尼古丁對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞纖溶功能的影響及其與內(nèi)皮素-I和白介素-6的關(guān)系.pdf

1、背景：香煙煙霧含有多種化合物, 絕大多數(shù)對(duì)機(jī)體有害。尼古丁為香煙煙霧中的有害物質(zhì)之一, 可以損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞, 抑制其纖溶活性, 誘發(fā)血栓形成,是血栓性疾病的重要危險(xiǎn)因素。組織型纖溶酶原激活物（t-PA）和纖溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）是纖溶系統(tǒng)的一對(duì)重要調(diào)節(jié)因子，主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌，二者的動(dòng)態(tài)平衡決定著纖溶系統(tǒng)的功能。吸煙可損傷內(nèi)皮細(xì)胞，誘發(fā)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞合成與釋放t-PA和PAI-1，導(dǎo)致纖溶功能紊亂，但有

2、關(guān)尼古丁介導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞纖溶紊亂與內(nèi)皮素、炎癥因子的關(guān)系報(bào)道尚少。
　　 目的：采用不同實(shí)驗(yàn)條件的尼古丁干預(yù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs），觀察其內(nèi)皮素-1（ET-1）、白介素-6（IL-6）、組織型纖溶酶原激活物（t-PA）與纖溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）蛋白的表達(dá)變化，并分析ET-1、IL-6與t-PA、PAI-1的相關(guān)性，探討尼古丁抑制內(nèi)皮細(xì)胞纖溶活性的可能機(jī)制。
　　 方法：采用HUVECs細(xì)胞株進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

3、。HUVECs株培養(yǎng)后接種于25cm×25cm的培養(yǎng)瓶中，隨機(jī)分為對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行以下研究。①對(duì)照組：培養(yǎng)液中加入與尼古丁相同體積的無菌PBS 液；②實(shí)驗(yàn)組（不同濃度尼古丁組）：將細(xì)胞隨機(jī)分為4組，各組分別于培養(yǎng)液中加入不同體積的尼古丁，使其終濃度分別為0.1、1.0、10及100μmol/L，與對(duì)照組同步培養(yǎng)，孵育12h后收集各組細(xì)胞上清液。采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心分析法（ELISA）測定各組上清液中t-PA、PAI-1、ET-

4、1及IL-6的抗原濃度。
　　 結(jié)果：（1）尼古丁對(duì)HUVECs 纖溶平衡的影響：HUVECs與不同濃度尼古丁孵育12h后，100μmol/L 尼古丁組PAI-1蛋白較對(duì)照組明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）；0.1、1.0及10μmol/L 尼古丁組PAI-1蛋白與對(duì)照組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。各濃度尼古丁組t-PA蛋白與對(duì)照組比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。（2）尼古丁對(duì)HUVECs

5、釋放炎癥因子的影響：HUVECs與不同濃度尼古丁孵育12h后，各組ET-I與IL-6蛋白與對(duì)照組比較均升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P﹤0.05）。（3）100μmol/L 尼古丁組ET-1、IL-6與PAI-1呈正相關(guān)， r值分別為0.666和0.731，均P﹤0.05。
　　 結(jié)論：（1）在體外，尼古丁可介導(dǎo)HUVECs 釋放PAI-1增高，導(dǎo)致t-PA/PAI-1失衡，引起內(nèi)皮細(xì)胞纖溶功能抑制。（2）尼古丁誘導(dǎo)的HUVECs