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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河^察三子養(yǎng)親湯對哮喘大鼠嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(Eotaxin,Eot-1、Eot-3)表達(dá)水平的影響,從藥效學(xué)水平探討三子養(yǎng)親湯改善哮喘癥狀的作用機(jī)制。
實(shí)驗(yàn)方法:將60只Wistar雄性大鼠隨機(jī)分成6組,每組各10只,分別為空白對照組、哮喘模型組、三子養(yǎng)親湯低劑量組(SZ-L)、中劑量組(SZ-M)、高劑量組(SZ-H)、孟魯司特組(MLS)。分為致敏和激發(fā)兩個階段,除空白對照組外,其他五個組大鼠在第1天和第14天
2、腹腔注射卵蛋白(OVA)致敏;模型組及各治療組連續(xù)霧化吸入1%卵蛋白生理鹽水激發(fā)14天(1次/天,每次30min),以此來建立哮喘模型??瞻讓φ战M以等量生理鹽水代替OVA致敏和激發(fā)。各組大鼠從激發(fā)第一天開始給予灌胃,灌胃時間在每次激發(fā)前1小時,根據(jù)分組不同來灌胃。實(shí)驗(yàn)過程中特別是激發(fā)階段注意觀察大鼠行為學(xué)改變。各組大鼠經(jīng)末次激發(fā)24h后,采集血清及肺組織標(biāo)本。并對肺組織進(jìn)行HE染色,觀察肺組織病理學(xué)改變。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)
3、檢測大鼠血清中的Eot-1蛋白、Eot-3蛋白的含量,運(yùn)用RT-PCR技術(shù)檢測大鼠肺組織的Eot-1mRNA、Eot-3mRNA表達(dá)水平。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)大鼠病理學(xué)表現(xiàn):與空白對照組比較,模型組大鼠細(xì)支氣管形態(tài)不規(guī)則,見較多的炎性細(xì)胞浸潤,管壁增厚,肺外觀體積增大,表面略腫脹,有不規(guī)則暗紅色充血區(qū),說明哮喘模型建立成功。孟魯司特組和三子養(yǎng)親湯各劑量組大鼠肺組織表現(xiàn):細(xì)支氣管形態(tài)規(guī)則,偶見炎性細(xì)胞浸潤,管腔內(nèi)見較少分泌物,上皮
4、完整,體積無明顯變化,表面充血區(qū)及出血點(diǎn)有明顯吸收的痕跡,面積明顯小于哮喘組,出血點(diǎn)數(shù)量也明顯減少。(2)大鼠血清Eot-1蛋白、Eot-3蛋白含量:①與空白對照組比較,模型組大鼠血清Eot-1蛋白、Eot-3蛋白的含量明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);②與模型組比較,各治療組大鼠血清Eot-1蛋白、Eot-3蛋白的含量低于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);③與孟魯司特組比較,三子養(yǎng)親湯高劑量組大鼠血清Eot-1蛋白、
5、Eot-3蛋白的含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);④三子養(yǎng)親湯各劑量組組間比較,高劑量組大鼠血清Eot-1蛋白、Eot-3蛋白的含量低于中、低劑量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑤三子養(yǎng)親湯低劑量組與中劑量組無明顯差異(P>0.05)。(3)大鼠肺組織Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達(dá):①與空白對照組比較,模型組大鼠血清Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達(dá)明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);②與模型組比
6、較,各治療組大鼠肺組織Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達(dá)低于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);③與孟魯司特組比較,三子養(yǎng)親湯高劑量組大鼠肺組織Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);④三子養(yǎng)親湯各劑量組組間比較,高劑量組大鼠血清Eot-1mRNA、Eot-3mRNA的表達(dá)低于中、低劑量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑤三子養(yǎng)親湯低劑量組與中劑量組無明顯差異(P>0.05)。
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