流式細(xì)胞術(shù)下觀察地塞米松和環(huán)孢素對(duì)嗜堿粒細(xì)胞活化的影響.pdf

1、背景:
　　 變態(tài)反應(yīng)性疾病在人群中十分常見,治療仍然棘手。嗜堿粒細(xì)胞作為Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞,正逐漸引起人們重視,可能成為治療變態(tài)反應(yīng)性疾病的重要靶點(diǎn)?，F(xiàn)有的方法通過檢測(cè)細(xì)胞介質(zhì)和細(xì)胞因子釋放量來觀察嗜堿粒細(xì)胞活化,操作較困難而且敏感性和特異性也不理想。流式細(xì)胞術(shù)的發(fā)展使體外檢測(cè)嗜堿粒細(xì)胞的活化成為可能,有著方便、快捷、敏感性和特異性均較好的特點(diǎn)。
　　 目的:
　　 在體外建立IgE介導(dǎo)的嗜堿粒細(xì)胞活化模型

2、,通過加入不同藥物濃度的地塞米松、環(huán)孢素和氯苯那敏,觀察嗜堿粒細(xì)胞表面活化標(biāo)記表達(dá)的變化,探討藥物對(duì)體外嗜堿粒細(xì)胞活化的作用。
　　 方法:
　　 抽取健康志愿者靜脈血,分為不同濃度的地塞米松、環(huán)孢素和氯苯那敏處理組,加入不同濃度的藥物在37℃預(yù)孵育1小時(shí),陰性和陽性對(duì)照組均加入等量的PBS并孵育1小時(shí)。隨后陽性對(duì)照組和藥物處理組分別加入抗IgE抗體以活化嗜堿粒細(xì)胞,陰性對(duì)照組加入等量PBS。各組細(xì)胞采用CD63FITC

3、/CD123PE/HLA-DRPerCP染色標(biāo)記,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血嗜堿粒細(xì)胞表面CD63的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.陰性對(duì)照組嗜堿粒細(xì)胞表面CD63陽性百分比為0.70±0.86％,陽性對(duì)照組嗜堿粒細(xì)胞表面CD63陽性百分比為50.58+9.04％,兩者差異有顯著性(P＜0.01)。
　　 2.不同濃度的地塞米松處理組中,嗜堿粒細(xì)胞表面CD63陽性表達(dá)受到明顯抑制,差異有顯著性(P＜0.01)。藥物

4、濃度越高,CD63陽性細(xì)胞越少。
　　 3.不同濃度的環(huán)孢素處理組中,嗜堿粒細(xì)胞表面CD63陽性表達(dá)均大幅降低,差異有顯著性(P＜0.01)。不同濃度的環(huán)孢素處理組之間,CD63表達(dá)沒有顯著性差異(P＞0.05)。
　　 4.濃度為10-2M氯苯那敏處理組CD63陽性的細(xì)胞百分比降低,與陽性對(duì)照相比差異有顯著性(P＜0.05),濃度為10-3M和10-4M的氯苯那敏處理組CD63陽性細(xì)胞和陽性對(duì)照組之間無顯著性差異(P＞