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文檔簡介
1、該研究試圖建立骨生成素-4在畢赤酵母Pichia pastoris中的表達技術(shù).主要研究工作包括:將骨生成素-4全長cDNA的成熟片段克隆到分泌型表達載體質(zhì)粒pPIC9K多克隆位點上,構(gòu)建能表達人骨生成素-4的載體質(zhì)粒.經(jīng)轉(zhuǎn)化酵母宿主菌株GS115和KM71,篩選多拷貝整合轉(zhuǎn)化子,PCR鑒定基因整合后,搖瓶培養(yǎng),用甲醇誘導(dǎo)表達.實驗結(jié)果表明,表達產(chǎn)物經(jīng)蛋白質(zhì)免疫印跡和定量點雜交分析證實表達產(chǎn)物具有良好的抗原性和特異性,在蛋白電泳分析結(jié)果
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