載DNA疫苗殼聚糖納米膠囊的研究.pdf

1、本文選用從甲殼類動物中提取的天然無毒、可生物降解、具有良好生物相容性的帶正電荷高分子材料-殼聚糖作為載體，制備了載DNA疫苗的殼聚糖-DNA疫苗納米粒。系統(tǒng)地研究了殼聚糖分子量，N/P，pH值，制備方法等因素對殼聚糖-DNA疫苗納米粒的形態(tài)、包埋率、載藥率、基因藥物在模擬體內環(huán)境下的釋放的影響。以優(yōu)化殼聚糖-DNA疫苗納米粒的制備條件，探討制備條件與殼聚糖-DNA疫苗納米粒的性質相關性，進而揭示殼聚糖-DNA疫苗納米粒作為基因治療的載體

2、的機理所在。 殼聚糖的結晶性、力學特性、通透性等都和殼聚糖分子量大小相關，而殼聚糖的許多獨特功能只有在分子量降低到一定程度時才表現(xiàn)出來。因此，選擇適當?shù)姆椒▽ぞ厶沁M行降解就顯得尤為重要。本文選用超聲波與H<,2>O<,2>氧化降解和微波技術與H<,2>O<,2>氧化降解的方法對殼聚糖進行降解以獲得純化的不同分子量的殼聚糖。結果表明：采用降解體系為4％的殼聚糖的5％乙酸溶液，加入最終濃度5％H<,2>O<,2>，進行超聲波輔助降

3、解80min或微波降解8min可獲得較滿意的結果。 殼聚糖分子荷正電，DNA疫苗分子荷負電，我們利用這一特點采用復凝聚法制備疫苗殼聚糖納米粒。以納米粒的平均粒徑與形態(tài)作為控制指標，進行單因素實驗。從納米粒的粒徑分布、形態(tài)、包埋率、載藥率、疫苗包埋量和體外釋放率等方面考察了納米粒的基本性質。結果表明：采用復凝聚制備法能夠實現(xiàn)殼聚糖對DNA疫苗的包埋，包埋率達到83.46％。制備的殼聚糖DNA疫苗納米粒呈亞球型，粒徑在300～600