利用嵌合體組織重組技術(shù)進(jìn)行人類牙齒再生的研究.pdf

1、目前人類牙齒的缺陷或缺失是普遍的現(xiàn)象，利用嵌合體組織重組技術(shù)進(jìn)行人類牙齒再生的研究，其最終目的是探討人牙髓干細(xì)胞的成牙潛能，并初步建立體外再生人類牙齒結(jié)構(gòu)的技術(shù)模型，為利用人類自身的干細(xì)胞在體外再生出可移植的牙胚或牙齒的進(jìn)一步研究奠定理論和技術(shù)基礎(chǔ)。 本研究利用體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法分離、培養(yǎng)兒童的乳牙牙髓干細(xì)胞(SHED)和成人的第三磨牙牙髓干細(xì)胞(DPSCs)，并通過組織重組、器官培養(yǎng)及組織形態(tài)學(xué)分析等方法，研究人牙髓干細(xì)胞的成

2、牙潛能。主要內(nèi)容及結(jié)論如下：1、將SHED或DPSCs與鼠E10.5非牙源性上皮重組制備嵌合體，發(fā)現(xiàn)人牙髓干細(xì)胞不能誘導(dǎo)非牙源性上皮形成牙齒結(jié)構(gòu)，說明SHED或DPSCs不具有誘導(dǎo)牙齒發(fā)育的能力；2、將SHED或DPSCs與鼠E10.5有誘導(dǎo)成牙能力的牙上皮重組制備嵌合體，并對(duì)不同發(fā)育時(shí)期-的重組組織塊進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析，沒有觀察到早期牙胚或牙齒結(jié)構(gòu)的形成，表明SHED或DPSCs不能直接被有誘導(dǎo)成牙能力的牙上皮誘導(dǎo)成牙；3、用有誘導(dǎo)成牙能

3、力的鼠源磨牙牙胚間充質(zhì)細(xì)胞與SHED或DPSCs混合后制備嵌合體，發(fā)現(xiàn)在E13.5鼠源磨牙牙胚間充質(zhì)細(xì)胞存在的條件下，SHED或：DPSCs能被鼠源牙上皮誘導(dǎo)形成牙齒結(jié)構(gòu)，說明SHED或DPSCs在體外可間接被誘導(dǎo)成牙；4、制備SHED或DPSCs與鼠E10.5牙源性上皮重組的嵌合體，在體外聯(lián)合外源生長(zhǎng)因子(BMP-4或FGF-8)的誘導(dǎo)，發(fā)現(xiàn)在BMP-4或FGF-8的作用下，鼠牙源性上皮能夠誘導(dǎo)人牙髓干細(xì)胞形成牙齒結(jié)構(gòu)，表明在外源生長(zhǎng)