芹菜素抑制博來霉素致小鼠肺纖維化及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究芹菜素抑制博來霉素誘導(dǎo)小鼠肺纖維化作用，并探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法：體內(nèi)實(shí)驗(yàn)使用ICR雄性小鼠，除正常對照組小鼠氣管內(nèi)滴注等體積生理鹽水外，其他小鼠使用博來霉素進(jìn)行氣管內(nèi)滴注造模，隨后分為模型組，芹菜素150和300 mg/kg組，以及陽性藥地塞米松0.125 mg/kg組。給藥組小鼠連續(xù)灌胃給藥28天，處死后檢測血清和肺組織中的氧化和抗氧化指標(biāo)、肺組織中的羥脯氨酸含量以及肺組織的形態(tài)學(xué)改變。用Western b

2、lot法測定了肺組織中的過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）、核因子κB p65（NF-κB p65）、轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）、Smad-7、E-cadherin和Vimentin蛋白的表達(dá)。體外實(shí)驗(yàn)選用肺泡上皮細(xì)胞系A(chǔ)549細(xì)胞，分為對照組、TGF-β1刺激組、芹菜素（2.5,5,10μM）三個濃度組和陽性藥羅格列酮（10μM）組，藥物作用細(xì)胞24h后檢測上皮特征蛋白E-cadher

3、in水平的變化，同時(shí)測定細(xì)胞中PPARγ和NF-κB p65蛋白表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：在體內(nèi)動物實(shí)驗(yàn)中，連續(xù)給予芹菜素150-300mg/kg28天后，可見肺重、肺重系數(shù)和肺組織中的羥脯氨酸含量降低，顯微鏡下可見肺組織中的炎癥細(xì)胞減少，肺泡壁厚度降低，纖維化程度減輕，尤以芹菜素300 mg/kg效果更為明顯。芹菜素可降低小鼠血清中的丙二醛（MDA）含量，增加超氧化物歧化酶（SOD）水平，同時(shí)芹菜素也可增加肺組織中的SOD和谷胱甘

4、肽（GSH）水平。給予芹菜素的小鼠，肺組織中的PPARγ、Smad-7和E-cadherin蛋白表達(dá)增加，而NF-κBp65、TGF-β1、MMP-9和Vimentin蛋白表達(dá)降低。在體外培養(yǎng)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，TGF-β1誘導(dǎo)的A549細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）過程中，芹菜素5-10μM作用24h后，可顯著地增加A549細(xì)胞上皮特征蛋白E-cadherin的表達(dá)，同時(shí)也可增加PPARγ的蛋白表達(dá)，抑制NF-κBp65的蛋白表達(dá)。