補陽還五湯對大鼠腎間質纖維化的作用.pdf

1、目的：觀察補陽還五湯對單側輸尿管梗阻大鼠腎臟間質纖維化及氧化應激的影響及并探討其機制。
　　方法：將60只雄性SD大鼠隨機分為正常組(Nor)，假手術組(Sham)，模型組(UUO)，白藜蘆醇組（Res)，補陽還五湯組(BYHW),地龍+黃芪組(D+H)，每組10只。術前5d開始灌胃，白藜蘆醇組以20mg/kg·d灌胃，正常組、假手術組及模型組灌以等量生理鹽水,中藥組每日以相應中藥灌胃。分別行單側輸尿管結扎術，假手術組只進行輸尿管

2、游離,術后連續(xù)灌胃3天、7天后每組處死5只，取手術側腎臟，HE，Masson染色觀察腎組織病理變化；免疫組織化學法檢測腎組織FN表達；化學比色法檢測腎組織勻漿MDA含量，Western blot檢測腎臟SIRT1、SIRT2、SIRT3、SOD2、CAT及n-NRF2蛋白表達。
　　結果：
　　1.腎臟病理顯示：正常組及假手術組均無異常變化，模型組與假手術組相比，第3d，7d腎組織結構均不清，見大量萎縮塌陷或擴張小管，間質炎

3、性細胞浸潤（P<0.001，P<0.001）；與模型組相比，第3d，7d補陽還五湯組、地龍+黃芪組及白藜蘆醇組病理損傷程度改變均明顯減輕（P<0.001，P<0.001，P<0.001）；
　　2.免疫組化顯示：正常組及假手術組腎小球及腎小管基膜上僅見少量棕黃色染色，在間質中未見明顯染色，兩組無明顯差異；模型組腎小球、腎小管基膜均見大量棕黃色染色，腎小管間質中亦可見大量棕黃色染色，較假手術FN表達均明顯增加（P<0.001，P<0

4、.001），三組用藥后均明顯減低（P<0.001，P<0.001，P<0.001）；
　　3.腎組織勻漿MDA檢測發(fā)現(xiàn)第3d，7d模型組腎組織MDA含量同假手術組對照均顯著增高（P<0.001，P<0.001），與模型組相比，第3d,7d三組用藥后腎組織MDA含量均不同程度的降低（P<0.001，P<0.001，P<0.001）；
　　4.Western blot結果發(fā)現(xiàn)：
　　(1）模型組同假手術組對照 SOD2及

5、CAT表達均明顯降低（P<0.001， P<0.001），兩中藥組SOD2及CAT表達均明顯增高（P<0.001，P<0.001），白藜蘆醇組SOD2蛋白在術后3d,7d均不同程度增高（P<0.001，P<0.05），但CAT表達較模型組無明顯變化。
　?。?）第3d，7d模型組較假手術組SIRI1，SIRT3蛋白表達均顯著降低（P<0.001，P<0.001）,術后3d,7d三組用藥均能不同程度增加SIRT1,SIRT3蛋白表達

6、，其中SIRT1蛋白在術后3d時地龍+黃芪組增加更顯著（P<0.001）,SIRT3蛋白在術后3d及7d時，地龍+黃芪組表達增加更顯著（P<0.05）；第3d，7d模型組較假手術組SIRI2蛋白表達均顯著增高（P<0.001，P<0.001），三個用藥組SIRT2表達均顯著降低（P<0.001，P<0.001，P<0.001）；
　?。?）術后3d及7d，相較模型組，地龍+黃芪組腎組織n-NRF2蛋白表達均明顯增高（P<0.001