補(bǔ)陽還五湯對大鼠視神經(jīng)損傷治療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、 學(xué)院代號 10716 學(xué) 號 010011010079 專業(yè)代碼 450224 密 級 陜 西 中 醫(yī) 學(xué) 院 Shaanxi University of Chinese Medicine 碩士學(xué)位論文 碩士學(xué)位論文 補(bǔ)陽還五湯對大鼠視神經(jīng)損傷 補(bǔ)陽還五湯對大鼠視神經(jīng)損傷 治療作用的實(shí)驗(yàn)研究 治療作用的實(shí)驗(yàn)研究 學(xué) 位 申 請

2、 人 梁 爽 梁 爽 專 業(yè) 名 稱 中 醫(yī) 五 官 科 中 醫(yī) 五 官 科 學(xué) 申 請 學(xué) 位 類 型 臨 床 臨 床 醫(yī) 學(xué) 碩 士 專 業(yè) 學(xué) 位 醫(yī) 學(xué) 碩 士 專 業(yè) 學(xué) 位 指 導(dǎo) 教 師 姓 名 仝 警 安 仝 警 安 論 文 提 交 日 期 2013 2013 年 4 月 中文摘要 目的 目的: 觀察補(bǔ)陽還五湯對實(shí)驗(yàn)性大鼠視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜的形態(tài)、視網(wǎng)膜視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（retinal gan

3、glion cells,RGCs）的數(shù)量及視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞膜上生長相關(guān)蛋白-43（growth associated protion 43，GAP-43）表達(dá)的影響，從而探討補(bǔ)陽還五湯對視神經(jīng)損傷的治療作用及其機(jī)理。 方法 方法: 1、選取清潔級成年雌性 SD 大鼠 40 只，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)分成 4 組，其中包括正常組 5 只、假手術(shù)組 5 只、對照組 15 只及治療組 15 只。假手術(shù)組只暴露視神經(jīng)但不夾持。對照組和治療組建立

4、視神經(jīng)鉗夾傷動物模型，并根據(jù)造模后取材觀察的時間點(diǎn)不同，分 5 天、14 天、28 天三個亞組，每個亞組 5 只。 2、造模成功后第二天開始，治療組灌服補(bǔ)陽還五湯，同時給予對照組和假手術(shù)組灌服等量生理鹽水，正常組不作處理。 3、分別在造模后 5 天、14 天、28 天取材，HE 染色光鏡下觀察大鼠視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜形態(tài)，使用病理圖像分析儀對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，應(yīng)用免疫熒光技術(shù)檢測視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中 GAP-43 的表達(dá)。 結(jié)果 結(jié)

5、果: 1．視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)觀察 正常組：大鼠視網(wǎng)膜約成三層細(xì)胞核平行分布，從內(nèi)到外分別為神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、 內(nèi)核層、 感光細(xì)胞層， 其中神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層約呈單層細(xì)胞排列，而內(nèi)核層和感光細(xì)胞層約呈多層細(xì)胞排列，且感光細(xì)胞層厚度約為內(nèi)核層厚度的 2倍。大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞近似卵圓形，大小不一，節(jié)細(xì)胞間呈相對緊密排列，內(nèi)界膜表面大致平滑。對照組：大鼠視網(wǎng)膜受損后，HE 染色光鏡下觀察顯示受損視網(wǎng)膜萎縮，厚度變薄，三層細(xì)胞核的數(shù)目均減少，每層細(xì)胞核之間的

6、排列與正常組相比更為疏松紊亂。其中，內(nèi)核層和感光細(xì)胞層的細(xì)胞數(shù)量雖然減少但相對不明顯，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGCs）的數(shù)量則呈明顯降低趨勢，細(xì)胞腫脹，細(xì)胞間排列較為稀疏， 與正常組相比甚至有視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的缺失。 治療組： 灌服補(bǔ)陽還五湯后，視網(wǎng)膜厚度僅輕度變薄，大鼠視網(wǎng)膜中神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)核層及感光細(xì)胞層的炎癥反應(yīng)均輕于對照組，且神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層中細(xì)胞數(shù)目多于對照組，腫脹程度亦輕。 2.視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（RGCs）計數(shù) 正常組與假手術(shù)組