嬰兒膽汁淤積性肝病的臨床、病理和基因診斷分析.pdf

1、第一部分：嬰兒膽汁淤積性肝病臨床及病理分析
　　目的：對嬰兒膽汁淤積性肝病患兒臨床資料和肝活組織檢查病理信息進行回顧性研究，分析其在該類疾病診斷中的意義。
　　方法：回顧性收集2014年1月至2015年7月在首都兒科研究所住院治療的86例膽汁淤積性肝病患兒臨床及病理資料，進行歸類總結。根據臨床和腹腔膽道探查結果分為膽道閉鎖組(biliaryatresia,BA)和非膽道閉鎖組(非BA組)，并進行兩組間資料對比分析。入選標準：

2、均符合第九屆美國兒科學會推薦的診斷標準：ALT和(或)AST值增高，血清TBil<85umol/L(5mg/d1)、DBIL>17.1umol/L(1mg/dl)或血清TBil>85umol/L、DBIL/TBil>20％；其中年齡>1歲因發(fā)病年齡在嬰兒期納入研究。
　　結果：1、非BA組和BA組臨床資料比較，結果發(fā)現(xiàn)發(fā)病年齡、就診年齡、肝腫大、陶土便、r-GGT、PT和APTT有統(tǒng)計學差異（P<0.05或P<0.01）,而CMV

3、感染、脾腫大、WBC、HB、ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、TBA和D-Dimer無統(tǒng)計學意義。2、共收集到本院病理資料68份（79.1%），302醫(yī)院光鏡病理26份。其中37例BA組病理主要表現(xiàn)為小膽管增生和纖維增生；非BA組病理結果主要顯示為肝細胞顯著腫脹、變性和淤膽，多核巨細胞形成和肝小葉結構尚存或欠清；光鏡病理主要顯示為肝細胞及毛細膽管不同程度的膽汁淤積，肝細胞腫脹、變性、壞死，多核巨細胞形成，匯管區(qū)擴大，小膽管增生

4、、閉鎖、消失，纖維組織增生，竇周炎及竇周纖維化，以肝細胞內和肝竇內炎性細胞浸潤為著。3、臨床檢查結果結合病理和基因診斷，68（79.1%）例患兒已經確診，其中因肝臟膽管和膽道系統(tǒng)異常引起的嬰兒膽汁淤積性肝病占主要原因，共49例（57.0%）。分別是膽道閉鎖Ⅲ型36例、膽道閉鎖Ⅰ型1例、肝內小葉間膽管消失或閉鎖12例（其中ALGS4例）。其他是希特林蛋白缺乏癥10例，進行家族性肝內膽汁淤積癥（PFIC）2例，先天性高直接膽紅素血癥2例，糖

5、原累積癥4型1例，靜脈營養(yǎng)性膽汁淤積性肝病2例，巨細胞病毒性肝炎2例。
　　結論：兩組間資料對比研究發(fā)現(xiàn)陶土便、r-GGT、凝血功能、肝臟腫大和病理結果均對鑒別非BA和BA有重要作用；膽汁淤積性肝病病因中BA占很大一部分，病理改變較非BA組特異性明顯；非BA組遺傳代謝性肝臟疾病占比較高，肝臟病理改變結合臨床資料增加了檢出率。
　　第二部分：目標基因捕獲結合第二代測序技術在嬰兒膽汁淤積性肝病中的運用
　　目的：建立目標基

6、因捕獲結合第二代測序技術對10例遺傳代謝性肝病患兒進行基因檢測，以明確其病因，并探討其技術在遺傳代謝性肝病中的運用價值。
　　方法：收集10例2014年1月至2015年7月年收入首都兒科研究所附屬兒童醫(yī)院臨床診斷不明確，并高度懷疑是遺傳代謝性肝病的患兒及其父母外周血（1例患兒缺失父母血），提取全血基因組DNA，采用目標基因捕獲結合第二代測序技術(NGS，nextgenerationsequencing)進行基因檢測，運用Sange

7、r法對基因突變型進行驗證。
　　結果：最終4例患兒檢測到Alagille綜合癥（ALGS）JAG1基因致病性突變，其中1例為新的插入突變，c.1779-1780insA，傳遞分析表明患兒母親攜帶c.1779_1780insA雜合突變；3個錯意突變，c.703G>A，c.839C>T，c.1720C>T，傳遞分析表明該3例患兒父母均不攜帶相關JAG1基因突變；糖原累積癥Ⅳ型1例，為復合雜合突變，c.1544C>T，c.1229A>C