白頭翁皂苷A誘導(dǎo)急性髓系白血病細(xì)胞分化及其作用機(jī)制的初步研究.pdf

1、【目的】
　　1.探討白頭翁皂苷A是否能誘導(dǎo)K562細(xì)胞向紅系分化。
　　2.探討白頭翁皂苷A是否能誘導(dǎo)急性髓系白血病細(xì)胞株向粒系分化。
　　3.觀察白頭翁皂苷A作用下K562向粒系分化過程中ERK、p-ERK等分化相關(guān)蛋白的表達(dá)水平的變化，部分揭示白頭翁皂苷A誘導(dǎo)K562細(xì)胞向粒系分化的分子機(jī)制。
　　4.觀察白頭翁皂苷A對(duì)急性髓系白血病原代細(xì)胞的影響。
　　【方法】
　　1.不同濃度的白頭翁皂苷A

2、作用K562細(xì)胞后，采用聯(lián)苯胺染色陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白測(cè)定及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞膜表面CD71及GPA分化抗原等方法評(píng)價(jià)白頭翁皂苷A對(duì)K562細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用。
　　2.不同濃度的白頭翁皂苷A作用急性髓系白血病細(xì)胞株（K562、U937及HL-60細(xì)胞）后，采用劉氏染色法觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞膜表面CD15分化抗原等方法評(píng)價(jià)白頭翁皂苷A對(duì)K562、U937及HL-60細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用。
　　3.不同

3、濃度的白頭翁皂苷A聯(lián)合U0216作用K562細(xì)胞后，通過Western印跡檢測(cè)ERK及p-ERK水平的變化，并通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞膜表面CD15分化抗原的表達(dá)。
　　4.通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)急性髓系白血病原代細(xì)胞膜表面相關(guān)抗原的表達(dá)評(píng)價(jià)白頭翁皂苷A對(duì)急性髓系白血病原代細(xì)胞的影響。
　　【結(jié)果】
　　1.白頭翁皂苷A對(duì)K562細(xì)胞的紅系誘導(dǎo)分化作用
　　不同濃度的白頭翁皂苷A均可升高K562細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量；上調(diào)

4、K562細(xì)胞膜表面CD71及GPA分化抗原的表達(dá)。其中以4μg/ml的白頭翁皂苷A的作用最為顯著。
　　2.白頭翁皂苷A對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞的粒系誘導(dǎo)分化作用
　　不同濃度的白頭翁皂苷A均可上調(diào)K562、U937及HL-60細(xì)胞膜表面CD15分化抗原的表達(dá)，且呈劑量依賴性；并在形態(tài)上有趨向粒系分化的改變，其中在K562、U937及HL-60細(xì)胞分別以5μg/ml、4μg/ml及3μg/ml的白頭翁皂苷A的作用最為顯著。

5、>　　3.白頭翁皂苷A誘導(dǎo)K562細(xì)胞粒系分化機(jī)制的初步研究
　　在干預(yù)時(shí)間內(nèi)，白頭翁皂苷A可上調(diào)ERK的磷酸化水平；在應(yīng)用MEK/ERK磷酸化抑制劑U0216預(yù)處理細(xì)胞后，可以抑制白頭翁皂苷A所引起的細(xì)胞分化。
　　4.白頭翁皂苷A對(duì)急性髓系白血病原代細(xì)胞的影響
　　白頭翁皂苷A可上調(diào)急性髓系白血病原代細(xì)胞表面CD15分化抗原的表達(dá)，且部分可影響CD34+的急性髓系白血病原代細(xì)胞。
　　【結(jié)論】
　　1.