長春花愈傷組織細胞突變的研究.pdf

1、長春花不僅是一種很有觀賞價值的花卉,而且還是一種名貴的藥用植物,中藥可全株入藥.含有100多種吲哚生物堿,多數(shù)具有生物活性,具有很高的藥用價值.如阿瑪堿、長春堿、長春質(zhì)堿等.其中,長春質(zhì)堿作為抗癌藥物的合成前體,近年來受到人們的高度重視.目前,細胞培養(yǎng)技術(shù)被公認為是生產(chǎn)長春花藥用成分最有效的途徑.該文以長春花愈傷組織為實驗材料,以長春質(zhì)堿和阿瑪堿為主要研究對象,并采用RP-HPLC法對長春質(zhì)堿和阿瑪堿進行分析測定;圍繞提高其藥用成分含量

2、,生物鮮重產(chǎn)量及篩選穩(wěn)定的細胞品系為中心,重點開展了EMS誘變、秋水仙堿誘變、吲哚生物堿的增產(chǎn)處理、積累規(guī)律分析等方面的研究.長春花二倍體愈傷組織和細胞的生長周期均可分為三個階段:適應(yīng)階段、對數(shù)生長階段和穩(wěn)定階段.適應(yīng)階段的愈傷組織細胞生長緩慢,吲哚生物堿含量也無明顯變化;對數(shù)生長階段以愈傷組織細胞的生長增殖為主;進入穩(wěn)定階段后,吲哚生物堿迅速積累.長春花懸浮培養(yǎng)細胞比愈傷組織生長周期短,生物產(chǎn)量高.EMS誘變細胞系研究發(fā)現(xiàn),長春花愈傷

3、細胞對EMS非常敏感,4小時處理,二倍體長春花愈傷細胞發(fā)生非整數(shù)倍變化,染色體由原來的16對變成96對左右;生理研究表明,誘變后的變異細胞系不僅生物產(chǎn)量高而且吲哚生物堿含量也高,阿瑪堿含量提高了約1倍,間隔幾代的生理性狀也比較穩(wěn)定.用秋水仙堿處理長春花愈傷細胞得到的四倍體細胞系優(yōu)于對照細胞系,變異后的細胞系生物鮮重有顯著的增加,最高生物產(chǎn)量可達33.0g/瓶,為對照的3倍,并且在吲哚生物總堿變化不大的前提下,目的藥用成分長春質(zhì)堿含量提高