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文檔簡介
1、隨著組織培養(yǎng)技術(shù)在植物中的應(yīng)用日益廣泛,將其用于生產(chǎn)植物次生代謝產(chǎn)物的研究也越來越深入。本研究以珍稀瀕危中藥材金鐵鎖(Psammosilene tunicoides W. C. Wu et C. Y. Wu)為試驗材料,研究不同培養(yǎng)條件對金鐵鎖愈傷組織誘導增殖和次生代謝產(chǎn)物色素積累的影響,并對金鐵鎖色素進行初步分離鑒定。一方面為該珍稀種質(zhì)資源的保護和充分利用提供新的思路,另一方面明確金鐵鎖愈傷組織細胞色素的主要成分,為實際生產(chǎn)中開發(fā)利用
2、天然、安全的植物色素提供新的途徑。主要結(jié)果與結(jié)論如下:
1.采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),研究不同的消毒組合、不同的培養(yǎng)條件對金鐵鎖種子的萌發(fā)率及不同外植體(莖、葉及芽)對愈傷組織誘導增殖的影響。結(jié)果表明:將種子分別置于75%乙醇中75 s、0.1%高錳酸鉀溶液中30 s及0.5%升汞中15 min消毒處理后進行萌發(fā),得到的種子萌發(fā)率高,且污染率較其他處理低。芽誘導愈傷組織效果比莖及葉較好,且適宜的激素組合為0.2 mg·L-12,4
3、-D和0.5 mg·L-16-BA,在此條件下誘導出的白色愈傷組織生長良好,可為進一步誘導積累色素提供充分的實驗材料。
2.通過比較不同培養(yǎng)條件下金鐵鎖愈傷組織生物量及色素產(chǎn)量的不同,篩選出利于愈傷組織增殖且色素合成的培養(yǎng)條件,結(jié)果表明:在基本培養(yǎng)基MS中同時添加1.5 mg·L-1 NAA和0.5 mg·L-16-BA時色素產(chǎn)量較高,優(yōu)于單獨添加NAA和6-BA的情況。此外,2,4-D處理對色素的積累有著明顯的抑制作用,IB
4、A對色素的誘導無明顯影響,采用1.5 mg·L-1的IAA也可誘導少量色素;MS和White培養(yǎng)基較其他培養(yǎng)基相比色素誘導積累效果更好,其適宜的培養(yǎng)條件為25℃、2000 lx和pH5.8。
3.通過對金鐵鎖愈傷組織誘導產(chǎn)生的色素進行初步提取鑒定和穩(wěn)定性分析。在不同的色素提取及分離條件下,其提取分離效果有所不同,結(jié)果表明:在30℃時使用2%鹽酸-甲醇溶液(溶劑料液比為1:10(g:mL))提取20 h,此條件下的色素提取效果較
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