肝素類藥物二維分析方法的建立和應(yīng)用.pdf

1、肝素是臨床應(yīng)用時間最長的一種生物大分子藥物，是為數(shù)不多的糖類藥物之一，是一種多分散性、微不均一性的硫酸化糖胺聚糖混合物。肝素作為靜脈抗凝劑在臨床上有著廣泛的應(yīng)用。目前肝素的制備是由動物組織中提取而來，低分子量肝素（LMWHs）是在肝素的基礎(chǔ)上經(jīng)過不同的降解方法得到，因此肝素類藥物有著復雜的結(jié)構(gòu)和組成，同時也很容易引入雜質(zhì)，所以對肝素類藥物有著極高的質(zhì)量控制要求，建立有效的肝素類藥物的質(zhì)量控制方法是十分重要和迫切的。目前已有的分析方法分辨

2、率低、無法得到完整的肝素類藥物結(jié)構(gòu)信息，無法滿足肝素類藥物質(zhì)量控制的要求。
　　本研究創(chuàng)造性地將多中心切割二維液相（MHC-2DLC）的思想用于肝素類藥物的寡糖分析上，建立了一種多中心切割二維液相與高分辨質(zhì)譜聯(lián)用（MHC-2D LC-Q/Tof MS）的分析方法，同時也建立了一種虛擬肝素寡糖數(shù)據(jù)庫。這種分析方法和數(shù)據(jù)庫的結(jié)合可以對LMWHs進行有效的、自動化的分析和比對。該二維液相系統(tǒng)由第一維的分子排阻色譜和第二維的反相離子對色譜

3、組成，分子排阻色譜可以將不同聚合度的寡糖分開，反相離子對色譜將相同聚合度下不同組成及相同組成不同結(jié)構(gòu)的LMWHs寡糖分開。數(shù)據(jù)庫的建立是在GlycResoft軟件對糖鏈糖基組成的預測和排列功能的基礎(chǔ)上，以肝素結(jié)構(gòu)特點和規(guī)律為依據(jù)所建立的。那屈肝素鈣（Nadroparin calcium）與依諾肝素鈉（Enoxaparin sodium）是具有代表性的兩種LMWHs，通過所建立的分析方法和數(shù)據(jù)庫解析，那屈肝素鈣中確認了88種不同結(jié)構(gòu)的肝素