喹諾酮類藥物和生物大分子的熒光分析方法研究與應(yīng)用.pdf

1、分析化學(xué)的飛速發(fā)展使得分析化學(xué)突破了單一學(xué)科的領(lǐng)域，由分析化學(xué)變?yōu)榉治隹茖W(xué)，涵蓋了化學(xué)與數(shù)學(xué)、物理學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)、生物學(xué)等一系列學(xué)科，發(fā)展成為一門多學(xué)科性的綜合學(xué)科，而分析化學(xué)的發(fā)展方向之一是提高分析方法的靈敏度和選擇性，之二是大力向生命科學(xué)領(lǐng)域拓展發(fā)展空間。 喹諾酮類藥物是一類較新的合成抗菌藥且新藥不斷涌現(xiàn)，目前在臨床上的應(yīng)用日益廣泛，建立高靈敏高選擇性藥物分子的檢測(cè)方法勢(shì)在必行。核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的定量分析是生物體液測(cè)

2、定和遺傳診斷的參數(shù)，是生命科學(xué)、化學(xué)等諸多學(xué)科中最活躍的領(lǐng)域之一。隨著藥學(xué)和生命科學(xué)的不斷發(fā)展，人們對(duì)藥物和生物大分子分析測(cè)定的要求越來越高，因此必須運(yùn)用和發(fā)展更適當(dāng)?shù)姆治龇椒▉頋M足要求。熒光光度法由于具有靈敏度高、選擇性好、簡(jiǎn)便等優(yōu)盧在藥物和生物大分子分析中得到廣泛應(yīng)用。本論文主要以熒光光度法為研究手段，在喹諾酮類藥物和生物大分子測(cè)定方法開發(fā)方面做了以下工作： 第一部分 喹諾酮類藥物的荷移光譜法研究 (1)以吸光光度

3、法為手段，研究了電子給體依諾沙星(enoxacin，ENX)與電子受體茜素紅(alizarin red，AR)之間的電荷轉(zhuǎn)移反應(yīng)，確定了反應(yīng)的最佳條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：依諾沙星與茜素紅在水溶液中室溫下即可生成穩(wěn)定的1∶2型絡(luò)合物，絡(luò)合物的λ<,max>=524 nm，依諾沙星濃度在0～20 mg/L范圍內(nèi)符合比爾定律，用擬定方法測(cè)定藥物制劑中依諾沙星的含量，結(jié)果與標(biāo)示量一致，其回收率為99.4～100.5％。 (2) 以熒光光度法

4、為手段，研究了加替沙星(GFLX)與電子受體四氯對(duì)苯醌(TCBQ)之間的荷移反應(yīng)，建立了靈敏度高、選擇性好的測(cè)定加替沙星新方法。用于藥物制劑中GFLX的含量測(cè)定，與吸光光度法對(duì)照，取得了一致的結(jié)果。同時(shí) 建立了測(cè)定尿樣中GFLX的荷移一同步熒光光譜法，有效避開了尿樣基體對(duì)藥物的干擾，成功的直接測(cè)定了尿液中的GFLX，結(jié)果與文獻(xiàn)值一致。 第二部分 生物大分子的分析方法研究 (1)以共振瑞利散射(RRS)技術(shù)為

5、手段，研究了Fe<'3+>與脫氧核糖核酸(DNA)的光譜特性和反應(yīng)的適宜條件，探討了光譜增敏機(jī)理和兩者之間的相互作用力。建立了一種簡(jiǎn)便、快速測(cè)定DNA的新方法。方法用于合成樣品中痕量DNA的測(cè)定，回收率在93.3％～100.9％。與染料散射法相比具有線性范圍寬、檢出限低等特點(diǎn)。 (2)以共振瑞利散射技術(shù)為手段，研究了在非離子表面活性劑吐溫-20存在下甲基藍(lán)與蛋白質(zhì)作用形成的離子締合物的光譜特征、影響因素和適宜的反應(yīng)條件，探討了光

6、譜增敏機(jī)理和兩者之間的相互作用力。并建立了測(cè)定蛋白質(zhì)的新方法，方法用于合成樣品中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定，結(jié)果滿意，用于牛血清樣品中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定，結(jié)果與經(jīng)典的考馬斯亮藍(lán)法一致。 (3)用熒光光譜法研究了多西環(huán)素(DC)與β-環(huán)糊精(β-CD)包結(jié)形成的超分子絡(luò)合物與牛血清白蛋白之間的相互作用。結(jié)果表明pH10.9的NH<,3>-NH<,4>Cl介質(zhì)中β-環(huán)糊精與多西環(huán)素生成1∶1的包結(jié)物，并使多西環(huán)素的熒光增強(qiáng)，在此二元包結(jié)體系中加