甾體激素類藥物分析方法應用研究.pdf

1、甾體激素類藥物是指分子結構中含有甾體結構的激素類藥物，由于具有多種生理活性，甾體激素藥物臨床使用日益廣泛，已成為藥物的一個重要分支。藥品質量直接關系人們的身體健康甚至生命安全，必須對藥品質量進行全面監(jiān)控，藥物分析學應運而生。甾體藥物分析研究包括三個方面:尋找準確可靠的方法對原料藥及制劑含量進行測定;尋求簡便、快速地從組成復雜的生物樣品中靈敏、可靠地檢測痕量藥物分析方法;研究甾體藥物與蛋白質、氨基酸等作用。
　　本論文研究目的是:以

2、光譜法或色譜法為檢測手段，利用分子有序聚集體的光譜增敏作用和選擇性萃取作用，探尋甾體激素類藥物更靈敏、更簡單的分離分析方法，并對增敏和萃取機理進行初步探討，其主要內容包括:
　　1、β-環(huán)糊精增敏熒光法測定醋酸阿比特龍酯和阿比特龍
　　提出分子有序聚集體β-環(huán)糊精(β-CD)增敏熒光法測定雄性激素醋酸阿比特龍酯及其新陳代謝產物阿比特龍含量的新方法，作用機理研究表明醋酸阿比特龍酯或阿比特龍可與β-CD形成包合物從而使其熒光強度

3、得到增強。對實驗條件進行了優(yōu)化，在優(yōu)化條件下醋酸阿比特龍酯或阿比特龍濃度在0.20-6.0μg/mL范圍內與熒光強度呈良好線性關系，檢測限分別為6.8 ng/mL（醋酸阿比特龍酯）(r=0.997)和6.6 ng/mL（阿比特龍）(r=0.996)。一般共存物質或藥物輔料對測定沒有干擾。使用本法測定了藥片中的醋酸阿比特龍酯和人血清/尿樣中阿比特龍含量，結果令人滿意。
　　2、表面活性劑/離子液體雙水相萃取熒光法分離分析藥物及生物樣

4、品中度他雄胺
　　基于雄性激素度他雄胺能夠被分子有序聚集體[表面活性劑十二烷基硫酸鈉(SDS)/離子液體溴化1-己基-3-甲基咪唑(IL)]雙水相體系萃取且萃取后熒光強度顯著增強，提出了測定藥物及生物樣品中度他雄胺含量的熒光新方法。雙水相形成是由于形成新的分子有序聚集體SDS/IL。對影響萃取和測定條件進行了優(yōu)化，在優(yōu)化條件下，萃取率在95.0％以上，富集倍數(shù)為7.5。線性范圍為0.016-0.64μg/mL，r=0.999(n=

5、8)，檢出限為2.2 ng/mL。將所提方法用于度他雄胺軟膠囊和人血清中度他雄胺含量測定，回收率在96.7％-108.0％，樣品測定結果與HPLC法一致。實驗中同時對雙水相萃取機理進行探討。
　　3、無分散劑超聲輔助離子液體分散液液微萃取HPLC分離分析醋酸烏利司他
　　提出一種基于超聲輔助離子液體分散液液微萃取HPLC測定鼠血清及藥片中孕激素醋酸烏利司他含量的新方法。在超聲幫助下，無需分散劑疏水性離子液體1-辛基-3-甲基

6、咪唑六氟磷酸鹽([C8mimPF6])即可形成細小的分子有序聚集體液滴分散在樣品水溶液中從而可定量萃取分析物醋酸烏利司他。對實驗條件如萃取劑的種類和用量、萃取時間、萃取溫度、溶液pH、離心時間等進行優(yōu)化。在優(yōu)化條件下，工作曲線的線性范圍為0.03-6.0μg/mL，檢測限分別為6.8 ng/mL（藥片）和9.3 ng/mL（血清），加標回收率為103.5％-109.7％，富集倍數(shù)為25。用本方法對醋酸烏利司他藥片和鼠血清樣品進行測定，結

7、果令人滿意。萃取機理表明疏水作用力是萃取的主要驅動力。
　　4、基于微量注射器的微型離子液體分散液液微萃取UV法分離分析鼠血清及藥物中達那唑
　　首次提出基于1 mL微量注射器的微型化分散液液微萃取分離分析藥物及鼠血清中雄性激素達那唑含量的新方法。通過注射萃取劑1-辛基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽([C8mimPF6])于樣品溶液中，以每秒一個循環(huán)的速度反復推拉幾次，萃取劑形成分子有序聚集體細小霧滴分散在樣品溶液中，從而快速萃取

8、被分析物。方法優(yōu)點為萃取中既不需使用任何分散劑，也無需借助超聲或高溫，萃取后以微量紫外分光光度法(UV)測定達那唑濃度。實驗中對萃取條件如萃取劑種類及用量、溶液pH、推拉次數(shù)及鹽的影響進行優(yōu)化。在優(yōu)化條件下，工作曲線的線性范圍為0.62-25.0μg/mL，檢測限分別為0.055μg/mL（藥片）和0.054μg/mL（血清），加標回收率為90.5％-103.4％。用本方法對達那唑膠囊和鼠血清樣品進行測定，同時與HPLC進行比較，結果令

9、人滿意。
　　5、超聲乳化-懸浮溶劑固化微萃取分離分析藥物及生物體液中愛普列特
　　提出基于超聲乳化-懸浮有機溶劑固化微萃取-微量紫外分光光度法測定藥片及人血清中雄性激素愛普列特(EP)含量的新方法。在超聲幫助下，分子有序聚集體1-十一醇在待測樣品水溶液中產生乳化現(xiàn)象，從而可定量萃取水相中的愛普列特，經(jīng)離心后冷卻1-十一醇液滴發(fā)生凝固而與水相分離，萃取率在90.0％以上，富集倍數(shù)為20。研究中還發(fā)現(xiàn)愛普列特對L-色氨酸自身熒