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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)對(duì)Helicobacter suis(H.suis)感染肥胖小鼠的研究,探討高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖對(duì)H.suis感染后小鼠胃黏膜相關(guān)淋巴樣組織(mucosa associated lymphoid tissue,MALT)形成的影響及其可能的機(jī)制,進(jìn)而有望為肥胖的促瘤機(jī)制提供新的研究方向。
方法:1.H.suis感染小鼠模型的建立:將40只雌性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為模型組和對(duì)照組,模型組每只小鼠給予0.5 mL經(jīng)PC
2、R檢測(cè)確定H.suis存在的豬胃黏膜勻漿液灌胃,對(duì)照組則給予等量磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline, PBS)灌胃。分別于灌胃1個(gè)月及3個(gè)月后處死兩組中的半數(shù)小鼠,取其胃黏膜組織,采用PCR方法檢測(cè)H. suis在小鼠胃內(nèi)的定植情況,HE染色方法檢測(cè)胃黏膜淋巴濾泡形成的情況。2.肥胖對(duì)H.suis感染后胃MALT形成及相關(guān)炎癥因子表達(dá)的影響:建模成功后,新購(gòu)40只雌性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為4組,每組10只,
3、即正常對(duì)照組(NC組)、高脂飲食組(HFD組)、H.suis感染組(HS組)和H.suis感染+高脂飲食組(HS+HFD組),將已經(jīng)感染H.suis小鼠的胃黏膜勻漿液(0.2ml/只)灌胃于HS組與HS+HFD組。NC組與HS組持續(xù)給予普通飲食,HFD組與HS+HFD組自感染后第3周開(kāi)始給予高脂飲食;差異性飲食24周后,處死各組小鼠取其胃組織,采用HE染色方法檢測(cè)各組小鼠胃黏膜淋巴濾泡的數(shù)量與大??;采用Real-time PCR方法檢測(cè)
4、各組小鼠胃黏膜瘦素(leptin)及其受體Ob-R、炎癥因子IFN-γ與趨化因子CXCL13、CCL2的表達(dá)量。
結(jié)果:1.灌胃所用豬胃黏膜勻漿液中存在H.suis;H.suis可以在小鼠胃內(nèi)定植,1個(gè)月及3個(gè)月后均檢測(cè)到該菌;H. suis感染可誘導(dǎo)小鼠胃黏膜濾泡的形成,并且感染3個(gè)月較感染1個(gè)月的淋巴濾泡明顯增大。2.與HS組相比,HS+HFD組小鼠胃黏膜淋巴濾泡的數(shù)量與大小明顯增加,胃黏膜leptin及其受體Ob-R,I
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