尼羅羅非魚耐鹽堿選育一代耐受性、生長性能及鰓Na+-HCO3-共轉(zhuǎn)運(yùn)子、碳酸酐酶基因表達(dá).pdf

1、尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）為廣鹽性魚類，經(jīng)馴化后可以在一定范圍的鹽堿水中生存生長，是開展耐鹽堿性能選育的重要候選種類。本論文以尼羅羅非魚耐鹽堿選育一代為材料，評估了幼苗急性鹽堿耐受性能，慢性鹽堿耐受性能及鹽堿水中生長性能；利用 PCR擴(kuò)增技術(shù)獲得了尼羅羅非魚Na+/HCO3-共轉(zhuǎn)運(yùn)子（NBCe1）基因cDNA部分序列，比較了單鹽（10、15）、單堿（1.5、3g/L NaHCO3）、鹽堿混合（鹽度10，堿度

2、1.5g/L；鹽度15，堿度3g/L）脅迫后不同時(shí)間（0、6、12、24、48、72、96h）血清滲透壓、離子濃度（Na+、K+、Cl-、Ca2+）以及鰓碳酸酐酶（CA）活性、CA與NBCe1 mRNA表達(dá)變化，主要結(jié)果如下：
　?。?）以上海、河北、山東品系尼羅羅非魚基礎(chǔ)群體（F0代）和經(jīng)鹽堿馴化選育一代（F1代）幼魚為試驗(yàn)材料，比較它們在不同鹽度組（10g/L、15g/L、20g/L、25g/L）中的半致死鹽度，碳酸氫鈉（Na

3、HCO3）堿度組（2g/L、4g/L、6g/L、8g/L、10g/L、12g/L）中的半致死堿度，以及鹽堿混合組（鹽度10g/L、15g/L、20g/L，堿度2g/L、4 g/L、6g/L）中的半致死鹽堿度。試驗(yàn)結(jié)果表明，尼羅羅非魚F1代幼魚96h的半致死鹽度為21.625-21.820，半致死堿度為7.903-8.407，半致死鹽堿度：10g/L鹽度下，堿度為5.577-6.096；15g/L鹽度下，堿度為3.940-4.794，F(xiàn)1

4、代幼魚96h半致死鹽堿度均顯著高于F0代幼魚（P<0.05）。選育一代中，河北品系幼魚鹽堿耐受能力顯著大于上海和山東品系（P<0.05）。研究結(jié)果為尼羅羅非魚鹽堿馴化選育研究提供了基礎(chǔ)資料。
　?。?）以尼羅羅非魚耐鹽堿選育一代為材料，開展了幼魚慢性致死實(shí)驗(yàn)和魚種不同鹽堿環(huán)境（S0A0、S10A0、S10A2、S10A4、S10A6）中生長試驗(yàn)，評估選育一代的鹽、堿耐受性能和生長性能。慢性致死實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，選育一代山東、上海、河北

5、品系的半致死鹽度分別為3.95±1.29、53.36±1.53、56.25±2.12g/L，半致死堿度分別為19.18±1.24、8.73±1.20、20.05±1.37g/L。生長實(shí)驗(yàn)表明，隨著鹽堿濃度的增加，選育一代的日增重率表現(xiàn)為下降趨勢。S0A0組顯著大于其他各組（P<0.05），S10A0、S10A2組間無顯著差異（P>0.05），但顯著大于10A4、S10A6組（P<0.05）；除S10A6組中山東品系日增重率大于上海、河北

6、品系（P<0.05）外，各鹽堿組中三個(gè)品系間無顯著差異。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為尼羅羅非魚耐鹽堿選育工作積累了基礎(chǔ)資料。
　?。?）為了理解鹽堿條件下魚類滲透調(diào)節(jié)機(jī)制，以尼羅羅非魚為實(shí)驗(yàn)材料，PCR擴(kuò)增得到了Na+/HCO3-共轉(zhuǎn)運(yùn)子（NBCe1）基因cDNA部分序列，比較了單鹽（10、15）、單堿（1.5、3g/L NaHCO3）、鹽堿混合（鹽度10，堿度1.5g/L、鹽度15，堿度3g/L）脅迫后不同時(shí)間（0、6、12、24、48、72、

7、96h）血清滲透壓、離子濃度（Na+、K+、Cl-、Ca2+）以及鰓碳酸酐酶（CA）活性、CA與NBCe1基因mRNA表達(dá)變化。結(jié)果顯示，血清滲透壓、離子濃度、鰓組織CA酶活、CA與NBCe1基因mRNA表達(dá)變化均與脅迫強(qiáng)度呈正相關(guān)。隨時(shí)間推移，血清滲透壓、離子濃度呈現(xiàn)先上升后下降的變化趨勢，單鹽、鹽堿混合組血清滲透壓較單堿組高。單堿組和鹽堿混合組中鰓CA活性較單鹽組高，低鹽堿脅迫（鹽度10，堿度1.5g/L）下CA活性較晚達(dá)最高。單鹽