黃豆苷元對(duì)尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)生長(zhǎng)的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、黃豆苷元(Daidzein)是大豆異黃酮中活性較強(qiáng)、含量較高的一種植物雌激素,化學(xué)結(jié)構(gòu)與哺乳動(dòng)物雌激素E2相似,具有潛在的類雌激素活性。隨著漁業(yè)養(yǎng)殖的發(fā)展,在飼料中以大豆蛋白替代魚粉成為一種趨勢(shì),大豆蛋白中富含黃豆苷元,其對(duì)生長(zhǎng)的影響尚不明確。為弄清黃豆苷元對(duì)羅非魚生長(zhǎng)的影響及其可能內(nèi)分泌調(diào)控作用機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)配置了含0、10、100和1000mg/g黃豆苷元的飼料,飼喂羅非魚幼魚8周,檢測(cè)了黃豆苷元對(duì)雌雄尼羅羅非魚生長(zhǎng)的影響,并圍繞GH

2、/IGF-I生長(zhǎng)軸線,從腦垂體生長(zhǎng)激素(GH)的合成與分泌,下丘腦神經(jīng)內(nèi)分泌因子(GnRHs、GnRHRs、NPY、NPYRs、PACAP、SS)的表達(dá),肝臟生長(zhǎng)激素受體(GHRs)表達(dá)和胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF-I)合成與分泌等多個(gè)方面初步探討了黃豆苷元促進(jìn)羅非魚生長(zhǎng)的原因。
　　本文研究結(jié)果表明:
　　1、含0、10、100、1000mg/g黃豆苷元的餌料飼喂羅非魚幼魚8周后,雌魚10和100μg/g處理組體長(zhǎng)體重與對(duì)照

3、組無顯著差異,1000μg/g處理組比對(duì)照組顯著升高;雄魚10μg/g處理組體長(zhǎng)體重與對(duì)照組無顯著差異,而100μg/g處理組比對(duì)照組極顯著升高,1000μg/g處理組比對(duì)照組顯著升高。各黃豆苷元處理組的攝食率、飼料系數(shù)與對(duì)照組相比,均無變化。說明100、1000μg/g黃豆苷元能夠促進(jìn)羅非魚的生長(zhǎng),但雌雄羅非魚對(duì)黃豆苷元的敏感性有差異,雄魚對(duì)黃豆苷元的敏感性高于雌魚。
　　2、含0、10、100、1000mg/g黃豆苷元的餌料飼

4、喂羅非魚幼魚8周后,采用實(shí)時(shí)定量 RT-PCR方法檢測(cè)了垂體 GH和下丘腦 GnRH1、GnRH2、GnRHR1、GnRHR2、NPY、NPYR1、NPYR2、PACAP、SS mRNA表達(dá)水平,采用RIA檢測(cè)了血漿中GH的含量。結(jié)果表明:雌雄魚垂體GH mRNA水平變化與生長(zhǎng)趨勢(shì)基本一致,1000mg/g黃豆苷元飼喂雌魚和100mg/g黃豆苷元飼喂雄魚的垂體GH mRNA顯著升高,其余各組均無顯著變化;但血漿GH水平在雌雄魚各處理組中

5、均無顯著變化。對(duì)下丘腦各調(diào)節(jié)因子的檢測(cè)表明,黃豆苷元促進(jìn)了雄性羅非魚100μg/g濃度組GnRH1、GnRH2、NPY、NPYR1 mRNA的表達(dá),可能由此促進(jìn)垂體GH的合成,但同時(shí)SS mRNA的表達(dá)也升高,垂體GH的分泌可能受到SS的抑制,因此造成了血漿GH水平的無變化;而雌性羅非魚1000μg/g濃度組僅GnRH1 mRNA的表達(dá)升高,可能由此促進(jìn)垂體GH的合成。
　　3、含0、10、100、1000mg/g黃豆苷元的餌料飼

6、喂羅非魚幼魚8周后,采用實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法檢測(cè)了肝臟GHR1、GHR2和IGF-I mRNA表達(dá)水平,采用IRMA檢測(cè)了血漿中IGF-I的含量。
　　結(jié)果表明:100mg/g黃豆苷元飼喂雄魚和1000mg/g黃豆苷元飼喂雌魚肝臟IGF-I mRNA表達(dá)與血漿IGF-I水平顯著升高,其相應(yīng)GHR2 mRNA表達(dá)也顯著增高。說明黃豆苷元可能通過促進(jìn)下游GHR2 mRNA的表達(dá)促進(jìn)IGF-I的合成與分泌,從而介導(dǎo)GH的促生長(zhǎng)作用。

7、
　　綜上所述,餌料中含100和1000mg/g黃豆苷元對(duì)尼羅羅非魚的生長(zhǎng)具有顯著的促進(jìn)作用,對(duì)雄魚的作用大于雌魚。
　　分析其內(nèi)分泌調(diào)控作用機(jī)理可能為:
　　(1)黃豆苷元通過促進(jìn)生長(zhǎng)軸上游能夠刺激生長(zhǎng)激素釋放的因子 GnRH1、GnRH2、NPY、NPYR1等的合成,增加GH的基因表達(dá),但GH的釋放受到SS的抑制;
　　(2)黃豆苷元通過促進(jìn)肝臟GHR2 mRNA的表達(dá),促進(jìn)IGF-I的合成與分泌,介導(dǎo)GH的