白介素36α在膿毒血癥中的免疫保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景：
　　膿毒血癥是由感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征，這種由感染引起的宿主應(yīng)答調(diào)節(jié)紊亂最終會(huì)導(dǎo)致器官功能的紊亂，嚴(yán)重威脅生命。膿毒血癥的死亡率很高，且目前臨床對(duì)膿毒血癥缺乏有效的治療措施。近年來(lái)的研究數(shù)據(jù)提示,白細(xì)胞介素-1(Interleukin-1,IL-1)家族的新成員白細(xì)胞介素36α(Interleukin-36α,IL-36α)在炎癥疾病的病理機(jī)制中占有重要地位,但其在膿毒血癥中對(duì)宿主應(yīng)答的作用尚未得知。
　　方法

2、：
　　用盲腸結(jié)扎穿刺（CLP）的方法構(gòu)建膿毒血癥模型，誘導(dǎo)多細(xì)菌感染的膿毒血癥，以研究IL-36α在膿毒血癥中對(duì)宿主應(yīng)答的影響；用定量PCR和ELISA檢測(cè)IL-36α在小鼠體內(nèi)的表達(dá)量；通過(guò)進(jìn)行生存率試驗(yàn)和細(xì)菌載量的測(cè)定，來(lái)衡量IL-36α在膿毒血癥中的保護(hù)或損傷作用；取小鼠肺、肝、脾、腎組織做組織切片并做HE染色，分析組織內(nèi)的炎性改變，通過(guò)TUNEL實(shí)驗(yàn)評(píng)判細(xì)胞凋亡程度；用流式細(xì)胞術(shù)和瑞士-吉姆薩染色來(lái)分析腹腔灌洗液中有核細(xì)

3、胞的數(shù)量及種類；提取腹腔巨噬細(xì)胞及骨髓中性粒細(xì)胞進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)IL-36α對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的功能的影響，取細(xì)胞上清測(cè)定IL-36α對(duì)炎癥細(xì)胞因子表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　IL-36α在膿毒血癥中的表達(dá)顯著上調(diào)。IL-36α處理過(guò)的CLP重癥膿毒血癥模型小鼠的死亡率降低。與PBS對(duì)照組小鼠相比，IL-36α處理組小鼠表現(xiàn)出更有效的細(xì)菌清除能力，組織炎癥程度被抑制，器官損傷更輕，且免疫細(xì)胞凋亡減少。IL-36α

4、在膿毒血癥中還可能具有治療價(jià)值，這在使用IL-36α抗體的實(shí)驗(yàn)中也得到了證實(shí)，特異性地封閉體內(nèi)IL-36α導(dǎo)致在輕度膿毒血癥中小鼠的死亡率增加。除此之外，我們還發(fā)現(xiàn)IL-36α增強(qiáng)了巨噬細(xì)胞對(duì)細(xì)菌的吞噬和殺傷，從而使得局部和全身的細(xì)菌清除能力增強(qiáng)。更重要的是，在構(gòu)建膿毒血癥模型之前耗盡小鼠體內(nèi)巨噬細(xì)胞，IL-36α的這種保護(hù)作用就消失了。
　　結(jié)論：
　　我們的結(jié)果表明IL-36α在宿主對(duì)膿毒血癥的防御應(yīng)答中發(fā)揮了重要的保護(hù)