大鼠腸巨噬細胞TREM-1表達對其侵襲力和腸上皮細胞增殖的影響.pdf

1、目的:
　　 探討髓系細胞觸發(fā)受體-1（Triggering receptor expressed on myeloid cells-1，TREM-1）在腸巨噬細胞中的表達對腸巨噬細胞侵襲力和腸上皮細胞增殖的影響，進一步明確腸巨噬細胞在腸屏障功能障礙（intestinal barrier dysfunction，IBD）中可能機制。
　　 方法:
　　 (1)體外分離、培養(yǎng)腸巨噬細胞及腸上皮細胞，將腸巨噬細胞分為

2、三組:
　　 ①空白對照組（Control組）:加入含10％胎牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基;
　　 ②脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）組（LPS組）:用LPS處理腸巨噬細胞，RPMI-1640培養(yǎng)液中LPS終濃度為1μg/ml;
　　 ③LPS+LP17組:用LPS及LP17聯(lián)合處理腸巨噬細胞，RPMI-1640培養(yǎng)液中LPS終濃度為1μg/ml，LP17終濃度為100 ng/ml。

3、r>　　 (2)利用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(Reverse transcription-polymerase chainreaction，RT-PCR)檢測三組實驗中大鼠腸巨噬細胞TREM-1和腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）的基因表達水平。
　　 (3)用Tanswell板將腸巨噬細胞和腸上皮細胞共培養(yǎng)，實驗按上述分組分別處理腸巨噬細胞，利用MTT法繪制腸上皮細胞生長曲線，Matr

4、igel侵襲實驗檢測腸巨噬細胞對腸上皮細胞的侵襲力。
　　 結(jié)果:
　　 (1)LPS組TREM-1及TNF-α的基因表達水平高于LPS+LP17組和Control組(均P＜0.05); LPS+LP17組與Control組相比無差異。
　　 (2) MTT法繪制的腸上皮細胞生長曲線顯示，兩實驗組與Control組相比，腸上皮細胞的生長均受到抑制（均P＜0.05）;但對LPS組腸上皮細胞生長的抑制大于LPS+LP

5、17組(P＜0.05)。
　　 (3)侵襲實驗中3組試驗平均穿膜細胞數(shù)分別為（29.3±2.1）、（46.0±3.6），（34.7±3.1）。LPS組與Control組比較差異具有明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，LPS組與LPS+LP17組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 (1) LPS可以刺激腸巨噬細胞TREM-1和TNF-α的表達，TREM-1特異性阻斷劑LP17不但能有效抑制腸巨