濃香型白酒糟醅中芽孢桿菌屬細(xì)菌的分類鑒定和16S rDNA序列系統(tǒng)發(fā)育分析.pdf

1、白酒的生產(chǎn)以泥窖窖池為基礎(chǔ)，窖池中的多種微生物，特別是棲息于酒醅中的微生物左右著酒的產(chǎn)量和品質(zhì)。細(xì)菌是窖池發(fā)酵三大菌群之一，濃香型白酒濃郁的香氣主要來源于發(fā)酵中后期的酯化增香期，而芽孢桿菌在這個時期大量增殖，成為酒醅的主要優(yōu)勢菌群。 本研究的酒醅樣品取四川某國家名酒廠市內(nèi)老酒坊窖池，雙輪底生產(chǎn)工藝，發(fā)酵正常；分析樣品為窖池中心糟醅(窖項以下150-175cm，中心75cm以內(nèi))樣品，每次取3點(diǎn)混合均勻作為一個分析樣品，取樣時間為

2、入窖發(fā)酵、發(fā)酵一周、發(fā)酵四周、發(fā)酵七周、發(fā)酵十周，共5次。首先采用常規(guī)的鑒定方法對分離到的菌株進(jìn)行鑒定，并把分離到的菌株劃分類群；最后，采用16S rDNA序列分析方法，驗證常規(guī)鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性，并對各類群的代表菌株進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析。系統(tǒng)發(fā)育分析的流程如下：提取用常規(guī)方法鑒定后各類群代表的菌株基因組DNA，利用基因組DNA為模板擴(kuò)增16S rDNA，并通過分子克隆等過程測定各類群的代表菌株16S rDNA全序列，最后對測得的序列進(jìn)行Bl

3、ast分析，并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。 首先通過細(xì)菌形態(tài)學(xué)特征的觀察，檢出芽孢桿菌屬細(xì)菌69株，然后參考生理生化實驗分析，將69株菌劃分為五大類群。再經(jīng)16S rDNA序列分析方法分析，確定樣品中芽孢桿菌屬細(xì)菌有地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)、解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、環(huán)狀芽孢桿菌(Bacillus circu