多發(fā)性硬化患者血清三種miRNA與VEGF的表達及相關性研究.pdf

1、背景與目的：
　　多發(fā)性硬化（multiple sclerosis，MS）是一種中樞神經系統(tǒng)慢性炎癥性脫髓鞘疾病，其發(fā)病原因不明，以空間和時間的多發(fā)性為其特征表現(xiàn)。對于MS的病因，目前尚缺乏確切的研究，相關流行病學資料研究顯示MS是一種多因素綜合作用的疾病，其中免疫調節(jié)機制紊亂在其發(fā)病過程中起重要的核心作用。近來研究發(fā)現(xiàn)由血管內皮生長因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)參與的血腦屏

2、障破壞、血管新生在MS的病程中具有重要作用，可能是MS病程呈慢性炎性脫髓鞘的主要原因。
　　微小 RNA（microRNA，miRNA）是一類在人體內正常表達的短鏈非編碼RNA，在細胞的增殖、分化、凋亡以及血管新生中具有重要的調控作用。近來研究顯示在MS患者外周循環(huán)中可以檢測到多種穩(wěn)定表達的miRNA，且發(fā)現(xiàn)有多種miRNA表達量與正常對照者相比具有顯著差異。由此認為檢測外周循環(huán)中的miRNA的表達量變化對于MS的診斷和鑒別具有重

3、要價值。本課題關注在多發(fā)性硬化復發(fā)組、緩解組和健康對照組血清中miR-199a-5p，miR-126、miR-200c和VEGF表達水平，分析MS患者各組之間miR-199a-5p，miR-126、miR-200c和VEGF的表達差異，探討它們在多發(fā)性硬化病程中的相關性。
　　方法：
　　1、針對45例多發(fā)性硬化復發(fā)組患者、37例多發(fā)性硬化緩解組患者和40例健康志愿者的血清標本，采用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的方法，檢測

4、三組中VEGF的表達水平變化。
　　2、針對45例多發(fā)性硬化復發(fā)組患者、37例多發(fā)性硬化緩解組患者和40例健康志愿者的血清標本，采用qPCR的方法，分別檢測三組中 miR-199a-5p，miR-126和miR-200c的表達水平變化。
　　結果：
　　1、復發(fā)組患者血清VEGF表達量為50.75±11.31，緩解組為27.36±9.83，對照組為15.64±3.26。復發(fā)組和緩解組患者的VEGF表達量均高于對照組，且

5、差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；復發(fā)組患者的VEGF表達量高于緩解組，且差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　2、復發(fā)組患者血清miR-199a-5p表達量為0.54±0.13,緩解組為0.73±0.22,對照組為0.74±0.39。復發(fā)組 miR-199a-5p表達量低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；緩解組 miR-199a-5p表達量低于對照組，但差異沒有統(tǒng)計學意義（P=0.235）；復發(fā)組 miR-19

6、9a-5p表達量較緩解組降低，且差異具有顯著統(tǒng)計學意義（P=0.001）。
　　3、復發(fā)組患者血清miR-126表達量為0.68±0.24,緩解組為1.29±0.61,對照組為1.04±0.58。復發(fā)組患者血清中miR-126表達量低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.001）；緩解組血清中miR-126的表達量高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P=0.003）；復發(fā)組血清中miR-126表達量較緩解組降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P

7、＜0.001）。
　　4、復發(fā)組患者血清miR-200c表達量為2.26±0.75,緩解組為0.99±0.57,對照組為0.76±0.42。復發(fā)組 miR-200c表達量高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P=0.005）；緩解組miR-200c的表達量高于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.001）；復發(fā)組miR-200c表達量較緩解組升高，差異無統(tǒng)計學意義（P=0.062）。
　　5、MS患者血清miR-199a-5p與VE

8、GF的表達水平的相關關系在復發(fā)組和緩解組中均呈負相關關系（r復發(fā)=-0.929,p復發(fā)=0.002；r緩解=-0.955，p緩解=0.000）。
　　6、MS患者血清miR-126與VEGF的表達水平的相關關系在復發(fā)組呈負相關關系（r=-0.601，p=0.001），在緩解組呈正相關關系（r=0.893，p=0.000）。
　　7、MS患者血清miR-200c與VEGF的表達水平的相關關系在復發(fā)組和緩解組均呈正相關關系（r復

9、發(fā)=0.81，p復發(fā)=0.005；r緩解=0.843，p緩解=0.000）。
　　結論：
　　1、miR-199a-5p在MS患者血清中表達量下調。
　　2、miR-200c在MS患者血清中表達量上調。
　　3、miR-126在MS患者不同病程時期表達量不同，復發(fā)期表達下調、緩解期表達上調。
　　4、VEGF與MS的發(fā)病有關，VEGF水平愈高，MS愈趨向于復發(fā)。
　　5、VEGF水平升高受miR-19