黃鱔中鮭魚促性腺激素釋放激素（sGnRH）cDNA的克隆及表達分析.pdf

1、本研究通過3’RACE和5’RACE的方法，從黃鱔的下丘腦總RNA中擴增出sGnRH的全長cDNA，全長為643bp，編碼一個90個氨基酸的前體。sGnRH前體包括：23個氨基酸的信號肽、10個氨基酸的sGnRH、具有結合酰胺化酶和前體處理位點的Gly-Lys-Arg序列和54個氨基酸的相關肽(GAP)。進化樹分析表明，黃鱔sGnRH與其它魚類的sGnRH處于同一組，與銀漢魚sGnRH處于同一分支，表明黃鱔與銀漢魚的進化關系較近。Nor

2、thern雜交在黃鱔前部腦(嗅球和前腦)檢測到很強的單一帶，約為500bp，在中部腦(下丘腦和中腦)和后部腦(后腦和延腦)未檢測到，表明黃鱔sGnRH在前部腦的表達量很高。RT-PCR結合Southern雜交的結果表明：黃鱔sGnRHmRNA在各腦區(qū)，包括嗅球、前腦、中腦、后腦、下丘腦、延腦，和垂體都有表達，其中，在嗅球、前腦、中腦和下丘腦表達量較高；在外周組織中，除腎臟外，均檢測到sGnRH的表達，其中精巢表達量最高。RT-PCR分析

3、表明在性逆轉過程中，黃鱔五個腦區(qū)的sGnRHmRNA表達分布存在差異。雌性魚在前腦的sGnRH表達量較高，其他腦區(qū)表達量較低；間性魚在后腦的sGnRH表達量較高，其它腦區(qū)表達較低；雄性魚各腦區(qū)sGnRH表達量普遍較低，嗅球和延腦比其它腦區(qū)表達量高。這些結果表明sGnRH可能參與了黃鱔性逆轉過程的調節(jié)?！　”狙芯坎捎冒攵縍T-PCR檢測了sGnRH對黃鱔性腺組織中GtHⅠβ和GtHⅡβ表達的影響。不同濃度sGnRH(0、0．1、1、1