進(jìn)食和去勢對大鼠空腸、胰腺促性腺激素釋放激素及其受體表達(dá)影響的研究.pdf

1、研究表明促性腺激素釋放激素（GnRH）類似物應(yīng)用于前列腺癌患者行去勢治療時(shí)可導(dǎo)致患者出現(xiàn)糖代謝紊亂；我們先前的研究顯示在與葡萄糖代謝密切相關(guān)的消化系統(tǒng)廣泛存在GnRH及其受體，進(jìn)食以及去勢是否會(huì)影響腸道和胰腺合成分泌GnRH，后者是否會(huì)以自分泌或旁分泌的方式作用于腸道和胰腺GnRH受體（GnRH-R），并通過影響、運(yùn)動(dòng)功能或調(diào)節(jié)其它腸道激素如：胰高血糖素、胰高血糖素樣多肽-1（GLP-1）等的分泌而對葡萄糖代謝產(chǎn)生影響，這些問題的探討有

2、利于深入理解腸胰系統(tǒng)GnRH在糖代謝中的作用。
　　第一部分，手術(shù)去勢和皮下注射GnRH類似物對大鼠空腸、胰腺GnRH及其受體表達(dá)的免疫組織化學(xué)定位
　　目的：
　　了解手術(shù)去勢和皮下注射GnRH類似物12周對雄性SD大鼠空腸及胰腺GnRH及其受體免疫組織化學(xué)定位的影響,為進(jìn)一步研究GnRH類似物在臨床應(yīng)用中出現(xiàn)的葡萄糖代謝紊亂的機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　采用免疫組織化學(xué)方法觀察了手術(shù)去勢和皮下注射G

3、nRH類似物亮丙瑞林（100ug/Kg）12周后大鼠在灌葡萄糖（2g/Kg）后3h時(shí)GnRH及其受體蛋白的免疫組織化學(xué)定位。
　　結(jié)果：
　　1．免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示手術(shù)去勢大鼠空腸、胰腺GnRH及其受體分布與正常大鼠相同。
　　2．免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示皮下注射GnRH類似物組大鼠空腸、胰腺GnRH及其受體分布與正常大鼠相同。
　　結(jié)論：
　　手術(shù)去勢和皮下注射GnRH類似物12周對大鼠空腸、胰腺GnRH及

4、其受體分布可能無影響。
　　第二部分，灌服葡萄糖溶液后大鼠空腸和胰腺GnRH及其受體mRNA的表達(dá)
　　目的：
　　通過觀察灌服葡萄糖溶液后不同時(shí)間點(diǎn)SD大鼠空腸和胰腺GnRH及其受體mRNA表達(dá)的變化，以期了解腸胰系統(tǒng)GnRH與糖代謝之間的關(guān)系。
　　方法：
　　采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法，觀察了SD大鼠灌服葡萄糖（2g/Kg）0min，15min，30min時(shí)空腸和胰腺的GnRH及其受體mRNA的表達(dá)。

5、
　　結(jié)果：
　　1．與空腹組相比，灌服葡萄糖15min組和30min組大鼠空腸GnRHmRNA相對表達(dá)量降低（P<0.05），而GnRH受體mRNA表達(dá)量在三組間無差異。
　　2．與空腹組相比，灌服葡萄糖后15min組大鼠胰腺GnRHmRNA表達(dá)量降低（P<0.05），灌服葡萄糖后30min時(shí)胰腺GnRHmRNA表達(dá)量與空腹組比較未見差異，同時(shí)GnRH受體在三組間無差異。
　　結(jié)論：
　　本研究首次對SD

6、大鼠在灌葡萄糖（2g/Kg）后不同時(shí)間點(diǎn)的GnRH及其受體mRNA在腸道和胰腺表達(dá)的差異進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)灌服葡萄糖早期大鼠空腸和胰腺GnRHmRNA相對表達(dá)量降低，說明空腸和胰腺的GnRH可能與葡萄糖代謝有關(guān)，其相關(guān)機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
　　第三部分，手術(shù)去勢對大鼠空腸、胰腺GnRH及其受體mRNA表達(dá)的影響
　　目的：
　　了解手術(shù)去勢12周后雄性SD大鼠空腸及胰腺GnRH及其受體表達(dá)的變化，為進(jìn)一步研究GnRH類似

7、物在臨床應(yīng)用中出現(xiàn)葡萄糖代謝紊亂的機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法，觀察了手術(shù)去勢12周對大鼠空腸和胰腺GnRH及其受體mRNA在灌服葡萄糖（2g/Kg）3h時(shí)表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　去勢大鼠空腸和胰腺GnRH、GnRH受體mRNA的相對表達(dá)量與對照組相比未見差異。
　　結(jié)論：
　　手術(shù)去勢對大鼠灌服葡萄糖（2g/Kg）3h時(shí)GnRH及其受體mRNA在空腸、胰腺的表達(dá)無

8、影響。
　　第四部分，皮下注射GnRH類似物對大鼠空腸、胰腺GnRH及其受體mRNA表達(dá)的影響
　　目的：
　　探討皮下注射GnRH類似物亮丙瑞林（100ug/Kg）12周后大鼠空腸、胰腺GnRH及其受體、胰高血糖素原（PG）和GLP-1受體mRNA表達(dá)的變化，為深入研究GnRH類似物在臨床應(yīng)用中出現(xiàn)的葡萄糖代謝紊亂的機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法，研究了皮下注射GnRH類似物亮

9、丙瑞林（100ug/Kg）12周后大鼠空腸及胰腺GnRH及其受體、胰高血糖素原和GLP-1受體mRNA在灌服葡萄糖（2g/Kg）3h時(shí)的表達(dá)差異。
　　結(jié)果：
　　1.與皮下注射生理鹽水組大鼠相比較，皮下注射GnRH組在灌服葡萄糖（2g/Kg）前空腹血糖升高（P<0.05），其余各時(shí)間點(diǎn)血糖相比較均未見差異，同時(shí)皮下注射GnRH類似物組的胰島素水平在灌葡萄糖（2g/Kg）0h和0.5h時(shí)顯著升高(P<0.05)，其余各時(shí)間點(diǎn)

10、胰島素水平未見差異。
　　2.空腸和胰腺GnRH及其受體、胰高血糖素原（PG）和GLP-1受體mRNA表達(dá)量在兩組間無差異。
　　3.包括GnRH類似物注射組和對照組在內(nèi)的所有大鼠的空腸GnRHmRNA表達(dá)量與胰高血糖素原mRNA的表達(dá)量呈正相關(guān)（r=0.959,P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　皮下注射GnRH類似物12周使大鼠空腹血糖和胰島素升高以及灌糖后早期胰島素分泌增加，結(jié)合大鼠空腸GnRHmRNA表達(dá)量

11、與胰高血糖素原mRNA的表達(dá)量呈正相關(guān)，提示GnRH類似物影響糖代謝的機(jī)制可能與腸胰系統(tǒng)的GnRH有關(guān)，其作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
　　小結(jié)：
　　本實(shí)驗(yàn)顯示，灌服葡萄糖早期大鼠空腸和胰腺GnRHmRNA相對表達(dá)量下降；皮下注射GnRH12周使大鼠空腹血糖升高，同時(shí)使大鼠空腹和早期胰島素分泌增加，但手術(shù)去勢大鼠無此改變。結(jié)合皮下注射GnRH大鼠和正常大鼠中空腸GnRHmRNA表達(dá)量與胰高血糖素原mRNA的表達(dá)量呈正相關(guān)的證據(jù)