線粒體凋亡通路關(guān)鍵因子在大鼠自發(fā)性乳腺腫瘤中的表達(dá).pdf

1、目的：在SD大鼠自發(fā)性乳腺腫瘤模型建立的基礎(chǔ)上，探討線粒體凋亡通路關(guān)鍵因子在SD大鼠自發(fā)性乳腺腫瘤中的表達(dá)規(guī)律及相互作用機(jī)制。
　　方法：首先為SD大鼠自發(fā)性乳腺腫瘤的篩查:將130只（♀∶♂=1∶1）Sprague Dawley(SD)大鼠，SPF屏障環(huán)境中飼養(yǎng)60周后剖殺收集大鼠自發(fā)性乳腺腫瘤組織，通過(guò)病理學(xué)檢查對(duì)腫瘤進(jìn)行定性并分類，分為3組:正常乳腺組織（Ⅰ組），良性乳腺腫瘤組織（Ⅱ組）和惡性乳腺腫瘤組織（Ⅲ組）。然后在乳腺

2、腫瘤模型建立的基礎(chǔ)之上進(jìn)行檢測(cè)線粒體凋亡通路相關(guān)因子在SD大鼠自發(fā)性乳腺腫瘤中的表達(dá)情況:分別采用SABC免疫組化染色和RT-RCR法檢測(cè)Bcl-2、Bid、P53、AIF、Cyt C、Apaf-1、Caspase-3、XIAP的蛋白和mRNA水平的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：130只大鼠中有14只檢出自發(fā)性乳腺腫瘤，均為雌性，腫瘤發(fā)生率為10.77％，雌性腫瘤發(fā)生率為21.54％;其中7只為乳腺纖維腺瘤，良性腫瘤發(fā)生率為5.38％，雌

3、性良性腫瘤發(fā)生率為10.77％;7只為乳腺癌（其中3例為乳腺腺癌，2例為乳腺乳頭狀癌，2例為浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌），惡性腫瘤發(fā)生率為5.38％，雌性惡性腫瘤發(fā)生率為10.77％。
　　線粒體凋亡通路上游關(guān)鍵因子表達(dá)情況:Bcl-2蛋白免疫組化結(jié)果顯示其蛋白在三組中表達(dá)有顯著差異，Ⅱ組中蛋白表達(dá)量顯著高于Ⅰ組(P＜0.01)，Ⅲ組中表達(dá)顯著增高(P＜0.05)。Bid蛋白在Ⅰ組中高表達(dá)，極顯著高于Ⅱ組和Ⅲ組(P＜0.01);同時(shí)Bid基因m

4、RNA相對(duì)表達(dá)量變化趨勢(shì)與蛋白表達(dá)一致，在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組中表達(dá)呈逐步降低的趨勢(shì)。P53蛋白在Ⅰ組有表達(dá)，Ⅱ組中表達(dá)顯著升高(P＜0.05)，Ⅲ組中表達(dá)升高極顯著(P＜0.01)，P53基因mRNA相對(duì)表達(dá)含量變化與蛋白表達(dá)變化趨勢(shì)呈一致性，在正常、良性、惡性組間的表達(dá)也是呈逐漸升高的趨勢(shì)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　中游關(guān)鍵因子表達(dá)情況:AIF蛋白在Ⅰ組高表達(dá)，其值顯著高于Ⅱ組和惡性腫瘤中的表達(dá)量，而Ⅱ組的表達(dá)量顯著高于Ⅲ組

5、(P＜0.01); AIF基因mRNA相對(duì)表達(dá)含量在三組中的變化趨勢(shì)與蛋白表達(dá)呈一致性，在三組間表達(dá)呈逐漸降低的趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。CytC蛋白在Ⅱ組中表達(dá)極顯著高于Ⅰ組和Ⅲ組中的表達(dá)量(P＜0.01)，另Ⅰ組中的表達(dá)量顯著高于Ⅲ組(P＜0.05)。Cyt C基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量在三組中也是呈現(xiàn)升高后降低的趨勢(shì)，與蛋白變化一致，差異極顯著(P＜0.01)。Apaf-1蛋白在正Ⅰ組中強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)，Ⅱ組中表達(dá)量顯著降低

6、;相對(duì)Ⅱ組，Ⅲ組中表達(dá)顯著升高;但Ⅲ組中表達(dá)顯著低于Ⅰ組中的表達(dá)(p＜0.01)。Apaf-1基因mRNA相對(duì)表達(dá)量變化在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組中呈逐漸降低趨勢(shì)，與蛋白表達(dá)變化趨勢(shì)有所不同，可能為轉(zhuǎn)錄、翻譯的不同步有相關(guān)性。
　　線粒體凋亡通路下游關(guān)鍵因子表達(dá):Caspase-3蛋白在Ⅰ組中表達(dá)量顯著高于Ⅱ組和惡性腫瘤中的表達(dá)量，而Ⅱ組的表達(dá)量極顯著高于Ⅲ組(P＜0.01); Caspase-3基因mRNA相對(duì)表達(dá)含量在三組中的變化趨勢(shì)與蛋

7、白表達(dá)呈一致性，在三組間表達(dá)呈逐漸降低的趨勢(shì)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。XIAP蛋白在Ⅰ組中有表達(dá)，Ⅱ組中表達(dá)顯著升高(P＜0.01)，Ⅲ組中表達(dá)升高極顯著(P＜0.01)，XIAP基因mRNA相對(duì)表達(dá)含量變化與蛋白表達(dá)變化趨勢(shì)呈一致性，在正常、良性、惡性組間的表達(dá)也是呈逐漸升高的趨勢(shì)，差異極顯著(P＜0.01)。
　　由以上結(jié)果可見(jiàn)線粒體凋亡通路上中下游關(guān)鍵因子的蛋白及mRNA在三組中的差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明線粒體