肝細(xì)胞生長因子聯(lián)合纈沙坦對自發(fā)性高血壓大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：觀察重組腺病毒-肝細(xì)胞生長因子(Ad-HGF)聯(lián)合纈沙坦對自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)心肌細(xì)胞凋亡的影響并探討其機(jī)制。
　　方法：6只雄性 Wistar大鼠(WKY)為正常對照組(N組,n=6)。24只雄性 SHR隨機(jī)分為4組:高血壓對照組(P組,n=6);Ad-HGF組(H組,n=6,實(shí)驗(yàn)開始時(shí),開胸,在SHR左室壁5點(diǎn)直接注入5×109 Pfu/ml Ad5-HGF,0.1 ml,術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)4周);纈沙坦組[V組,n=6

2、,纈沙坦灌胃30 mg/(kg?d)4周];Ad-HGF聯(lián)合纈沙坦組[HV組,,n=6,實(shí)驗(yàn)開始時(shí),開胸,在SHR左室壁5點(diǎn)直接注入5×109Pfu/ml Ad5-HGF,0.1 ml,術(shù)后給予纈沙坦灌胃30 mg/(kg?d)4周]。H組及HV組術(shù)后各死亡一只。干預(yù)開始前后每周測量一次SHR尾動(dòng)脈血壓。干預(yù)4周后,處死所有大鼠,用TUNEL法測心肌凋亡指數(shù)(AI),ELISA法測定心肌HGF、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspa

3、se-3)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的表達(dá),用免疫組化法分析心肌Bcl-xl水平,用Western blot法觀察并評定心肌組織抗凋亡蛋白Bcl-xl和caspase-3的含量。
　　結(jié)果：
　　1.干預(yù)前測量各組大鼠血壓:N組SBP(110.09±2.92)mmHg、DBP(82.75±3.70) mmH,P組SBP(175.60±3.37)mmHg、DBP(134.44±4.21)mmHg,H組SBP(176.59±2.

4、79)mmHg、DBP(135.05±3.31)mmHg,V組 SBP(179.42±6.76) mmHg、DBP(139.39±3.92)mmHg和HV組SBP(179.65±3.16)mmHg、DBP(137.31±4.25),N組大鼠 SBP、DBP低于其余各組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其余4組間SBP、DBP差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。干預(yù)1周后,P組SBP(203.43±3.15)mmHg仍維持較高水平,顯著高

5、于其余4組(P<0.05);干預(yù)2周后,H組、V組和HV組SBP開始下降(184.15±7.8,153.63±6.50,151.55±5.48)mmHg,4周末時(shí),V組與HV組SBP低于H組(181.04±8.59)mmHg(P<0.05)。各組舒張壓變化趨勢同收縮壓;(見表1,圖1-1、1-2)
　　2.干預(yù)4周后,H組、V組、HV組、P組間各項(xiàng)指標(biāo)比較:
　　(1)心肌HGF的表達(dá),以HV組最高(87.72±1.12)

6、ng/L(P<0.05),其次為H組(84.73±2.26) ng/L,V組(77.76±1.12) ng/L,均較P組(67.72±2.13)ng/L明顯升高(P<0.05);
　　(2)心肌c a s p a s e-3變化水平與 H G F相反,以HV組的含量最低(8.46±0.43) pmol/l(P<0.05),其次為H組(10.21±0.58)pmol/l,V組(10.64±0.17)pmol/l,均較P組(15.47

7、±1.15) pmol/l明顯降低(P<0.05);
　　(3)心肌A n gⅡ的表達(dá),以HV組的含量最低(2.38±0.16) ng/ml(P<0.05),其次為 V組(3.30±0.07)ng/ml,H組(3.43±0.06)ng/ml,較 P組(4.95±0.12) ng/ml降低尤為明顯(P<0.05);
　　(4)心肌凋亡指數(shù)(AI)以HV組降低顯著(P<0.05),其次為H組、V組,均較P組明顯降低(P<0.05

8、);
　　(5)心肌Bcl-xl表達(dá)含量以HV組最高(P<0.05),其次為H組、V組,均較P組明顯升高(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.Ad-HGF聯(lián)合纈沙坦及兩者單獨(dú)用藥均可在不同程度上降低SHR血壓;
　　2.Ad-HGF聯(lián)合纈沙坦抑制SHR的心肌細(xì)胞凋亡優(yōu)于單獨(dú)用藥;
　　3.Ad-HGF聯(lián)合纈沙坦抑制 SHR心肌細(xì)胞凋亡的優(yōu)勢可能在于,兩者可以通過不同途徑更加充分地降低 AngⅡ的表達(dá),阻斷