黑腹果蠅Neurexin精確定位研究.pdf

1、神經(jīng)遞質(zhì)受體，粘附分子及其它支架分子和信號分子在突觸的正確組裝對整個腦的完整性和連接性及正確的神經(jīng)遞質(zhì)釋放起著至關(guān)重要的作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)Neurexin及Neuroligin這對分子在突觸形成及突觸行使功能中起著重要作用。 Neurexin當初是因為它能夠與黑蜘蛛毒素α-latrotoxin相互作用而被發(fā)現(xiàn)的。哺乳動物里共有三個neurexin基因，分別是neurexinⅠ，neurexinⅡ及neurexinⅢ，這三個基

2、因各有兩個不同的啟動子。我們通過生物信息學分析及實驗證明果蠅基因組中只有一個neurexin基因（neurexin-1），且只有一種轉(zhuǎn)錄形式（CG7050），在預(yù)測的結(jié)構(gòu)上與高等動物里的α-neurexin有著很大的同源性。本實驗室先前的研究表明Neurexin-1表達在果蠅胚胎的神經(jīng)系統(tǒng)，而且在胚胎早期就開始表達。免疫熒光染色證明它在胚胎、幼蟲及成蟲里都集中于腦及腹神經(jīng)管的突觸密集區(qū)分布，并和一些突觸標記分子共定位。但是Neurexi

3、n的突觸精細定位目前還未知曉。 免疫電鏡技術(shù)是可以在超微結(jié)構(gòu)水平對目的分子進行精確定位的一種方法，其中包埋前免疫電鏡技術(shù)具有操作相對簡單，背景少等優(yōu)點而被廣泛麻用于一些人們感興趣分子的定位研究。因此本文以果蠅為模式生物，利用包埋前免疫電鏡技術(shù)對Neurexin進行精確定位。 通過在果蠅神經(jīng)系統(tǒng)（NMJ和VNC）建立包埋前免疫電鏡技術(shù)，發(fā)現(xiàn)在果蠅三齡幼蟲內(nèi)源性的Neurexin主要定位在突觸位點，突觸前后都有分布，但在突觸