阿司匹林抑制上皮性卵巢癌進(jìn)展和增敏順鉑化療的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　研究阿司匹林對(duì)上皮性卵巢癌遷移、增殖和順鉑化療反應(yīng)性的影響及其相關(guān)分子機(jī)制。
　　方法:
　　1.劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)阿司匹林對(duì)上皮性卵巢癌細(xì)胞遷移能力的影響，EdU染色和細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)阿司匹林對(duì)上皮性卵巢癌細(xì)胞增殖及克隆形成能力的影響。
　　2. MTT法檢測(cè)不同濃度阿司匹林作用下順鉑對(duì)上皮性卵巢癌細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度（50％inhibitory concentration,

2、 IC50）。
　　3.選取6周齡、雌性BALB/c-nu/nu裸鼠18只，使用A2780-Luciferase-GFP雙標(biāo)細(xì)胞按組織塊接種法建立卵巢癌原位移植瘤模型，隨機(jī)分為三組（對(duì)照組，單用順鉑組，阿司匹林聯(lián)用順鉑組）做相應(yīng)處理（純水灌胃+生理鹽水腹腔注射；純水灌胃+順鉑腹腔注射；阿司匹林灌胃+順鉑腹腔注射）。隔日稱量體重，觀察裸鼠基本情況和活動(dòng)狀態(tài)；每七天進(jìn)行一次活體成像，連續(xù)觀察在體腫瘤生長(zhǎng)情況。裸鼠處死后測(cè)量移植瘤瘤徑，

3、計(jì)算瘤體積和腫瘤抑制率。
　　4.阿司匹林（濃度梯度）處理上皮性卵巢癌細(xì)胞后，免疫印跡（WB）檢測(cè)p53蛋白表達(dá)水平及其乙?；降淖兓?；實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（qRT-PCR）檢測(cè)p53下游基因p21、bax、foxf1、puma、rad在轉(zhuǎn)錄水平的變化。
　　結(jié)果:
　　1.阿司匹林抑制上皮性卵巢癌細(xì)胞A2780、C13K、OV2008的遷移、增殖和克隆形成能力，并且此抑制作用呈濃度依賴性。
　　2.在A278

4、0、C13K、OV2008細(xì)胞中，阿司匹林能有效降低順鉑對(duì)上皮性卵巢癌細(xì)胞的IC50。
　　3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，單用順鉑組和阿司匹林聯(lián)用順鉑組的腫瘤抑制率分別為49.3%和78.4%，兩藥聯(lián)用組的腫瘤抑制率明顯高于單用順鉑組（P＜0.05）。
　　4.與對(duì)照組相比，阿司匹林處理組上皮性卵巢癌細(xì)胞p53蛋白水平無(wú)明顯變化，但p53 k382位點(diǎn)乙?；缴险{(diào)，并且呈濃度依賴性；p53下游靶基因p21、bax、foxf1、puma、