TRAMP-C2凍融抗原聯(lián)合PEP-3多肽致敏樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)CTL對(duì)TRAMP-C2作用的研究.pdf

1、目的：研究TRAMP-C2腫瘤凍融抗原聯(lián)合PEP-3多肽致敏樹突狀細(xì)胞(DCs)體外誘導(dǎo)前列腺癌特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞( CTL)對(duì)前列腺癌細(xì)胞TRAMP-C2的殺傷效應(yīng)。
　　方法：聯(lián)合應(yīng)用rhGM-CSF和rhIL-4體外培養(yǎng)誘導(dǎo)骨髓來源單核細(xì)胞獲得樹突狀細(xì)胞，負(fù)載TRAMP-C2腫瘤細(xì)胞凍融抗原和/或PEP-3多肽后發(fā)育為成熟樹突狀細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)檢測其細(xì)胞表型的變化。與同種異體脾T淋巴細(xì)胞共同孵育24h后刺激成為CTLs

2、，將其與TRAMP-C2細(xì)胞共培養(yǎng)，通過流式細(xì)胞術(shù)、CCK8實(shí)驗(yàn)、軟瓊脂克隆實(shí)驗(yàn)、Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)以及劃痕實(shí)驗(yàn)檢測其對(duì)前列腺癌細(xì)胞TRAMP-C2的殺傷效應(yīng)。ELISA法檢測DCs和CTL上清液中IFN-γ, TNF-β,以及IL-12含量。
　　結(jié)果：與未致敏樹突狀細(xì)胞相比，致敏樹突狀細(xì)胞高表達(dá)與其成熟相關(guān)的MHC-II分子、細(xì)胞粘附分子和共刺激分子(CD11c，CD40，CD80，CD86)。凍融抗原聯(lián)合PEP-