氬氦冷凍膠質(zhì)瘤細胞致敏樹突狀細胞誘導(dǎo)腫瘤殺傷效應(yīng)的實驗研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 1 1 級碩士學(xué)位論文氬氦冷凍膠質(zhì)瘤細胞致敏樹突狀細胞誘導(dǎo)腫瘤殺傷效應(yīng)的實驗研究I n V e s t i g a t i o n o nT u m o r K i U i n g E f f e c t I n d u c e d b y D e n d r i t i cC e l l sP u l s e d W i t h A r ．H e C r y o a b l a t i o n o n G l i

2、o m a C e l l s課題來源： 國家自然科學(xué)基金學(xué)位申請人導(dǎo) 師 姓名專 業(yè) 名 稱培 養(yǎng) 類 型培 養(yǎng) 層 次所 在 學(xué) 院答辯委員會主席答辯委員會成員殷志林張世忠教授神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)型碩士研究生第二臨床醫(yī)學(xué)院郭英教授陸永建教授李方成教授歐陽輝教授曹志愷教授論文評閱人 曹志愷教授趙連旭副教授2 0 1 4 年3 月2 5 日 廣州摘要的表面，同時上調(diào)D C 表面共刺激分子( C D 8 0 、C D 8 6 ) ，黏附分子的表

3、達形成成熟D C 后，可識別并激活腫瘤抗原特異性T 細胞，同時D C 分泌I L ．1 2 等細胞因子而刺激T 淋巴細胞增值，產(chǎn)生腫瘤殺傷效應(yīng)。氬氦冷凍治療腫瘤后，局部形成大量壞死組織，這些壞死組織作為腫瘤抗原被D C 攝取，進一步促進T 淋巴細胞活化增值是產(chǎn)生腫瘤特異性免疫反應(yīng)的關(guān)鍵。研究表明，氬氦冷凍是產(chǎn)生組織壞死的一種有效方法，細胞壞死包括細胞膜及胞質(zhì)的破裂及細胞器的釋放。此過程對于體內(nèi)免疫細胞是一個很強的活化信號。同時壞死又使細

4、胞因子大量釋放，使得抗原遞呈細胞被活化的可能性增加。與傳統(tǒng)熱療不同，冷凍療法并不會對腫瘤內(nèi)部的抗原肽產(chǎn)生大的破壞。這些相對較完整的腫瘤特異性抗原肽隨著腫瘤細胞的裂解被釋放到周圍組織中，極易被體內(nèi)抗原呈遞細胞攝取并呈遞給T 淋巴細胞從而產(chǎn)生細胞免疫效應(yīng)。近年來大量體內(nèi)外的實驗研究表明，腫瘤組織冷凍消融后的凍融產(chǎn)物可促進D C的成熟及其抗原遞呈功能，并可有效激活T 淋巴細胞產(chǎn)生抗腫瘤免疫反應(yīng)。目前，腫瘤抗原致敏D C 后形成的D C 疫苗已

5、經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床并取得了較好的療效。D C 疫苗的主要制各方法包括腫瘤抗原多肽致敏D C 、腫瘤細胞的蛋白提取物致敏D C 、D C 與腫瘤細胞互相融合、腫瘤細胞提取的D N A 或m R N A致敏D C 、細胞因子或趨化因子基因修飾D C 等。理想的腫瘤抗原D C 疫苗應(yīng)當是能夠誘導(dǎo)針對多種腫瘤抗原表位的多克隆反應(yīng)，而且不誘導(dǎo)自身免疫反應(yīng)，無安全隱患，不受患者M H C 的限制，制備和應(yīng)用簡單方便。而采用腫瘤細胞的裂解物致敏D C

6、，可以克服因單一抗原誘發(fā)的免疫反應(yīng)不能完全殺滅腫瘤細胞的缺陷，因此采用凍融裂解腫瘤細胞致敏D C 制備的D C 疫苗具有較好的應(yīng)用前景。因此，基于樹突細胞具強大的抗原呈遞能力，本研究選用小鼠G L 2 6 1 膠質(zhì)瘤細胞系作為研究對象，首先，利用氬氦冷凍凍融膠質(zhì)瘤細胞，提取腫瘤抗原，致敏C 5 7 B L ／6 小鼠骨髓源D C ，流式細胞儀檢測D C 表面分子的表達，證明凍融產(chǎn)物是否可促進D C 的成熟，同時檢測D C 分泌的細胞因子