Il-8對微小凹結(jié)構(gòu)中SH-SY5Y細胞VGCC功能響應的影響.pdf

1、IL8對微小凹結(jié)構(gòu)中sHSY5。Y細胞VGcc功能響應的影響⑧重慶大學碩士學位論文(學術學位)學生姓名：王正偉指導教師：吳澤志教授專業(yè)：生物學學科門類：理學重慶大學生物工程學院二O一二年四月重慶大學碩士學位論文主莖塑翌——————————————————————————————————————————————————————————————————————————————一——摘要通過構(gòu)建聚乳酸(PLLA)準三維微小凹結(jié)構(gòu)研究SH—SY

2、5Y細胞電壓依賴鈣通道(VGCCs)的響應情況。SHSY5Y人神經(jīng)母細胞瘤細胞與微小凹結(jié)構(gòu)復合后，細胞在結(jié)構(gòu)上呈現(xiàn)三種不同的生長行為特點：二維(2D)生長方式；三維(3D)生長方式和近似二維(N2D)的生長方式，分別生長在結(jié)構(gòu)的表面，結(jié)構(gòu)的側(cè)壁以及結(jié)構(gòu)底部。我們研究了微小凹結(jié)構(gòu)是否有利于細胞呈三維生長以及不同生長類型在微小凹結(jié)構(gòu)中的比例。白光圖片下對細胞的鋪展程度進行了分析。同時以熒光染料鈣綠1和激光共聚焦顯微技術評價SHSY5Y細胞分

3、化前后VGCC功能響應性。進而用ELISA方法研究了平面基底和微小凹結(jié)構(gòu)中白細胞介素8(IL一8)的分泌情況，同時評價了外源性IL8對細胞VGCC功能響應的影響。實驗結(jié)果顯示微小凹中的細胞(N2D和3D)與平面基底上的2D細胞相比形態(tài)上更趨于圓形且鋪展面積也減少。當用50mM的高鉀刺激時，微小凹中的細胞在陽性細胞比例和VGCC反應幅度上都低于平面基底上的細胞。而且無論是鋪展面積還是VGCC反應幅度，N2D細胞的數(shù)值都介于2D細胞和3D細

4、胞之問，這表明細胞形態(tài)和VGCC功能響應之問相關聯(lián)。而IL8在微小凹結(jié)構(gòu)中的分泌量高于平面基底上的分泌水平。以梯度濃度的外源性IL8作用于SHSY5Y細胞發(fā)現(xiàn)，高濃度的IL一8明顯降低了細胞VGCC的響應性。所有結(jié)果表明微小凹結(jié)構(gòu)構(gòu)型以及細胞的生長行為特點都影響著細胞VGCC功能的響應，而且IL8對SHSY5Y細胞在微小凹結(jié)構(gòu)中功能完善扮演了重要的角色。同時本研究也為以細胞為基礎的實驗系統(tǒng)中細胞功能的構(gòu)建提供了新的方法。關鍵詞：聚乳酸，