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1、目的:許多研究已經(jīng)證實(shí),前庭神經(jīng)核有神經(jīng)纖維直接向腦干內(nèi)調(diào)節(jié)心血管功能的自主神經(jīng)核團(tuán)投射,同時(shí)本實(shí)驗(yàn)室的前期研究已經(jīng)證明,硝普鈉(sodium nitroprusside,SNP)誘發(fā)的急性低血壓時(shí),機(jī)體內(nèi)存在由外周前庭器官-前庭內(nèi)側(cè)核、前庭神經(jīng)核-孤束核、孤束核-延髓頭端腹外側(cè)區(qū)的途徑參與繼發(fā)性的血壓調(diào)節(jié)過(guò)程。但是,在這些途徑中是否有脊髓和腎上腺髓質(zhì)的參與,尤其是前庭神經(jīng)核與脊髓、延髓頭端腹外側(cè)區(qū)與脊髓之至腎上腺髓質(zhì)的功能聯(lián)系尚無(wú)研究
2、報(bào)道,更無(wú)在這一聯(lián)系中谷氨酸的離子型受體AMPA和NMDA的作用研究。本文在去除壓力感受器的情況下,觀察了前庭神經(jīng)內(nèi)側(cè)核與脊髓、延髓頭端腹外側(cè)區(qū)與脊髓的功能聯(lián)系及其與腎上腺髓質(zhì)的關(guān)系,并初步探討了谷氨酸的部分離子型受體在這一聯(lián)系中的作用。
方法:首先將36只SD雄性大鼠進(jìn)行頸動(dòng)脈竇和主動(dòng)脈弓壓力感受器去除手術(shù),利用多道生理記錄儀觀察動(dòng)物血壓壓力感受性反射敏感性,待確定手術(shù)成功后,分為阻斷劑和激動(dòng)劑組。阻斷劑組又分為對(duì)照組、MK
3、-801組和CNQX組,激動(dòng)劑組又分為對(duì)照組、NMDA組和 AMPA組,每組6只。利用微量泵以1μl/min流速,分別向前庭神經(jīng)內(nèi)側(cè)核和延髓頭端腹外側(cè)區(qū)注射ACSF、MK801、CNQX、NMDA、CNQX。其中阻斷劑組MK-801和CNQX的劑量是200μmol/L,激動(dòng)劑組的NMDA、AMPA的劑量為100μmol/L,對(duì)照組均注射人工腦脊液(ACSF)。核團(tuán)給藥后10min后,阻斷劑組靜脈注射SNP誘發(fā)急性低血壓,而激動(dòng)劑組則不誘
4、發(fā)低血壓。然后用促凝管心臟取血后離心取血清,用ELASA方法測(cè)定腎上腺素或去甲腎上腺的含量,取脊髓T5段進(jìn)行冰凍切片(25μm)進(jìn)行免疫組化染色和蛋白印跡分析法,觀察T5段脊髓灰質(zhì)側(cè)角神經(jīng)元內(nèi)c-Fos蛋白和p-ERK1/2蛋白的表達(dá)情況。
結(jié)果:⑴MVN區(qū)域注射Glu受體阻斷劑CNQX或MK-801后,再誘發(fā)急性低血壓,T5段脊髓灰質(zhì)側(cè)角區(qū) c-Fos、p-ERK1/2蛋白表達(dá)和血清中腎上腺素的濃度明顯少于對(duì)照組(P<0.0
5、5,n=6)。⑵MVN區(qū)域注射Glu受體激動(dòng)劑NMDA或AMPA,則使T5段脊髓灰質(zhì)側(cè)角區(qū)c-Fos、p-ERK1/2蛋白表達(dá)和血清中腎上腺素的濃度明顯增加,與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑶RVLM區(qū)域注射Glu受體阻斷劑CNQX和MK-801后,再誘發(fā)急性低血壓使T5段脊髓灰質(zhì)側(cè)角內(nèi)c-Fos、p-ERK1/2蛋白表達(dá)和血清中腎上腺素和去甲腎上腺素的濃度明顯減少,且與對(duì)照組相比較有顯著性差異。⑷RVLM區(qū)域注射Glu受體激動(dòng)劑NMDA或
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