臭氧和高壓氧對大鼠顱腦創(chuàng)傷后腦水腫的治療作用.pdf

1、目的：通過檢測給予不同治療手段的重型顱腦創(chuàng)傷大鼠體內(nèi)抗過氧化物(SOD、MDA及GSH-Px)的含量的動(dòng)態(tài)變化，觀察頭部MRI的變化，測定腦水含量，并比較行為學(xué)評分，觀察腦創(chuàng)傷后腦組織病理切片HE染色，探討臭氧對大鼠創(chuàng)傷后腦水腫的保護(hù)作用并比較與高壓氧的治療效果。
　　方法：本課題將SD大鼠120只隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham）、手術(shù)對照組（TBI）、高壓氧組（HBO）和臭氧組（Ozone），每組30只，每組又分為術(shù)后1d、3d、5

2、d、7d和病理切片組5個(gè)亞組，每個(gè)亞組6只，采用液壓打擊儀制作左側(cè)腦創(chuàng)傷模型，進(jìn)行相應(yīng)的處理后，每個(gè)亞組分別在術(shù)后連續(xù)7d進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評分，相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死大鼠取包括血腫中心部位在內(nèi)的部分腦組織利用干濕重法稱重腦水含量，同時(shí)提取腦勻漿測定SOD、GSH-Px和MDA的含量。病理切片亞組在術(shù)后6h、1d、3d、5d和7d行動(dòng)物核磁檢查，以T2WI為標(biāo)準(zhǔn)，觀察顱內(nèi)腦水腫的情況，該亞組在7d之后處死，取完整大腦留作病理切片觀察。
　　結(jié)

3、果：
　　1.各組大鼠改良后的神經(jīng)行為學(xué)評分（mNSS）比較：sham組和其他三個(gè)組各時(shí)間點(diǎn)比較，評分明顯較低；HBO組和Ozone組在3d、4d、5d、6d、7d的評分低于TBI組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），OT組在5d、6d、7d的評分低于HBO組，差異顯著（p<0.05），而三組在6h、1d、2d的評分無顯著差異（p＞0.05）。
　　2.各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)腦組織 SOD含量變化顯示：sham組和其他三個(gè)組各

4、相同時(shí)間點(diǎn)比較，SOD含量明顯較高（p<0.05）；TBI組、HBO組和 Ozone組在1d時(shí)間點(diǎn)無顯著差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）；HBO組和Ozone組在3d、5d、7d的SOD含量明顯高于TBI組（p<0.05），且兩者之間無差異（p＞0.05）；各組GSH-Px含量變化同SOD變化趨勢相一致；各組MDA含量變化顯示：Sham組和其他三個(gè)組各相同時(shí)間點(diǎn)比較，MDA含量明顯較低；TBI組、HBO組和Ozone組在1d、3d時(shí)間

5、點(diǎn)無顯著差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；HBO組和Ozone組在5d和7d的MDA含量明顯低于TBI組（p<0.05），而其兩者之間無差異（p＞0.05）。
　　3.各組大鼠腦組織腦水含量比較顯示：除7d外，sham組和其他三個(gè)組各相同時(shí)間點(diǎn)比較，腦水含量明顯較低；TBI組、HBO組和Ozone組在1d、3d時(shí)間點(diǎn)無顯著差異，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；HBO組和Ozone組在5d腦水含量明顯低于TBI組（p<0.05），而

6、其兩者之間無差異（p＞0.05）；在7d，Ozone組腦水含量低于HBO組（p<0.05），同時(shí)Ozone組和Sham組之間無顯著差異（p＞0.05）。
　　4.同時(shí)各組大鼠腦組織核磁共振 T2WI結(jié)果顯示高壓氧和臭氧對于重型顱腦創(chuàng)傷急性期具有治療效果，促進(jìn)血腫的吸收，有助于顱內(nèi)狀況的改善，但僅從核磁上觀察，兩者無明顯差別。
　　5.各組HE染色結(jié)果顯示：Sham組腦組織無明顯的病理改變，細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰完整，層次清晰，細(xì)胞核清

7、晰，核仁位于細(xì)胞核中間，細(xì)胞呈圓形，未見凋亡細(xì)胞或壞死。其他各組均存在明顯的病理改變，TBI組可見明顯的紅細(xì)胞集聚，排列紊亂，細(xì)胞體積縮小，細(xì)胞輪廓消失,可見細(xì)胞吸收后遺留的空泡，病理損傷程度明顯高于其他組，而HBO組高于Ozone組。Sham組神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)正常，未見明顯腦創(chuàng)傷；后三組在腦組織充血、水腫，灰質(zhì)和白質(zhì)彌漫性出血灶，腦皮質(zhì)分層結(jié)構(gòu)，灰白質(zhì)分界以及多形核炎性細(xì)胞聚集程度等病理變化上存在一定的可觀察的差別。
　　結(jié)論

8、：
　　1. TBI能引起機(jī)體一系列的病理生理學(xué)變化：包括神經(jīng)行為學(xué)、影像學(xué)、組織病理學(xué)及細(xì)胞分子水平上的相應(yīng)改變。
　　2. TBI后神經(jīng)功能及行為活動(dòng)受損，MRI結(jié)果能準(zhǔn)確客觀的顯示出顱腦創(chuàng)傷的變化，同時(shí)腦組織形態(tài)學(xué)發(fā)生明顯改變，皮層、海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)結(jié)構(gòu)受損嚴(yán)重。再者，機(jī)體內(nèi)氧化應(yīng)激增強(qiáng)，抗氧化酶系統(tǒng)受損，自由基大量產(chǎn)生，炎性細(xì)胞因子釋放，最終引起遲發(fā)型神經(jīng)元變性，導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞壞死與凋亡。
　　3. TBI后經(jīng)一定時(shí)

9、間的高壓氧及臭氧治療，相對于手術(shù)對照組而言，神經(jīng)行為學(xué)評分（mNSS）下降，同時(shí)谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性增強(qiáng)，丙二醛（MDA）的含量下降，MRI上T2WI顯示顱內(nèi)血腫有所改善，腦水含量下降，病理學(xué)HE染色提示神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)損傷有所減輕，從形態(tài)學(xué)方面表現(xiàn)出了一定的治療作用。
　　4.在改善神經(jīng)行為學(xué)評分（mNSS），減輕腦水含量以及從病理組織 HE染色結(jié)果顯示減輕組織病理學(xué)損傷等方面，兩者存在