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文檔簡介
1、目的:本實驗以廣西茉莉花葉為研究對象,對其中的黃酮類化合物進行提取和分離,明確廣西茉莉花葉中黃酮類化合物的抗氧化活性,闡明茉莉花葉黃酮類化合物抗氧化活性及其構(gòu)效關系和作用機理。
方法:廣西茉莉花葉用95%乙醇浸漬法提取,減壓濃縮得乙醇提取物浸膏 M1分兩部分:一部分依次經(jīng)石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取并減壓濃縮得石油醚浸膏M2、氯仿浸膏M3、乙酸乙酯浸膏M4;另一部分經(jīng)索氏回流提取后,經(jīng)減壓濃縮得M5浸膏,分別用AB-8和H103
2、兩種大孔吸附樹脂富集分離分別得富集物M6和富集物M7。用紫外分分光光度法測定各部位總黃酮含量,通過HPLC確定分離條件,選擇AB-8大孔吸附樹脂結(jié)合制備液相色譜技術對總黃酮進行單體分離純化,通過現(xiàn)代波譜和光譜技術對黃酮單體進行結(jié)構(gòu)鑒定。對黃酮單體化合物進行清除DPPH、O2-·、·OH等自由基、還原Fe3+、與Fe2+螯合以及對DNA間接損傷的保護作用展開研究,并探討抗氧化活性構(gòu)效關系和作用機理。
結(jié)果:用分光光度法,以蘆丁為
3、標準品,繪制標準曲線:回歸方程為y(吸光度)=10.633x(濃度mg/ml)-0.0008,R2=0.9995。再對浸膏M1、M2、M3、M4、M6、M7進行總黃酮含量測定,得到總黃酮含量是:M1(0.0743g/g)、M2(0.0993g/g)、M3(0.2306g/g)、M4(0.2149g/g)、M6(0.2943g/g)、M7(0.2495g/g)。從茉莉花葉分離得到五種黃酮類化合物單體:化合物1為槲皮素-3-O-(2,6-α
4、-L-二吡喃鼠李糖基)-β-D-吡喃半乳糖苷、化合物2為毛里求斯排草素、化合物3為山奈酚-3-β-刺槐糖苷、化合物4為槲皮素-3-β-刺槐糖苷和化合物5為煙花苷。在抗氧化活性方面的實驗,五種黃酮化合物單體對清除DPPH、O2-·、·OH等自由基、還原Fe3+、與Fe2+螯合以及對DNA間接損傷的保護作用都表現(xiàn)出了較好的抗氧化活性,而且抗氧化能力和其劑量呈正相關關系。五種黃酮化合物單體抗氧化活性構(gòu)效關系主要含有以下幾點:酚羥基的取代數(shù)目和
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