黃酮類化合物的雌激素樣活性及其構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥是由于女性在絕經(jīng)后體內(nèi)雌激素水平驟然下降，導(dǎo)致骨鈣的流失而引起的。應(yīng)用雌激素替代治療(ERT)可明顯減輕婦女絕經(jīng)期癥狀、預(yù)防骨質(zhì)疏松，但長期應(yīng)用ERT卻可能引發(fā)子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌和陰道出血等副作用。
　　 植物雌激素是治療骨質(zhì)疏松的有效途徑之一，在體內(nèi)既可以啟到雌激素樣作用，又避免了使用雌二醇帶來的副作用，其代表是被廣泛認(rèn)為具有雌激素樣作用的Daidzein和Genistein，他們同屬于黃酮類化合物。為了設(shè)計出

2、更加有效的化合物來滿足臨床治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥和其他一些雌激素缺乏而引起的病癥，本實(shí)驗(yàn)采用了E-SCREEN體系，對幾種黃酮類化合物的雌激素樣作用的構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行了研究。基于此，我們設(shè)計并開展了一系列實(shí)驗(yàn)研究，主要包括：
　　 (1)E-SCREEN體系的建立；
　　 (2)金雀異黃酮與大豆苷元的雌激素樣活性與構(gòu)效關(guān)系研究；
　　 (3)淫羊藿苷及其擬代謝物的雌激素樣作用研究；
　　 (4)木犀草素與芹菜素

3、的雌激素樣作用體外研究；
　　 (5)柑橘素和芹菜素的雌激素樣作用體外研究。
　　 本實(shí)驗(yàn)用10-7、10-8、10-8、10-10mol·L-1濃度的各受試黃酮類化合物處理細(xì)胞后，MTT法測定MCF-7增殖率，增殖細(xì)胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA)免疫組化法檢測其對體外培養(yǎng)MCF-7細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的影響；Real-time RT-PCR法檢測ERα、ERβ、

4、PR和PS2 mRNA表達(dá)水平變化。Western-blot法檢測ERα蛋白表達(dá)水平變化。
　　 雌激素樣活性結(jié)果：金雀異黃酮＞芹菜素：金雀異黃酮＞大豆苷元；芹菜素＞木犀草素；芹菜素＞木犀草素；淫羊藿素＞脫水淫羊藿素＞淫羊藿次苷I＞淫羊藿苷。結(jié)果表明：
　　 (1)黃酮母核B環(huán)的位置影響雌激素樣活性大小，在3號位更強(qiáng)；
　　 (2)黃酮類母核AC雙環(huán)5位碳原子上的羥基可以增強(qiáng)雌激素樣活性；
　　 (3)B

5、環(huán)的5’位置羥基(-OH)影響雌激素樣活性大?。?br>　　 (4)用C-C單鍵取代了芹菜素的黃酮母核AC雙環(huán)的2和3號碳原子之間的C=C共軛雙鍵而活性大大增強(qiáng)；
　　 (5)糖基阻礙與ER結(jié)合，活性降低；
　　 (6)異戊烯基阻抑了雌激素活性。
　　 本文篩選出了幾種雌激素樣活性較為強(qiáng)烈的黃酮類化合物：淫羊藿素，金雀異黃酮等；基本闡明了具有雌激素樣活性的黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)與效能的關(guān)系；探討了ERβ特殊的對雌激