氟西汀聯(lián)合拉莫三嗪抗小鼠強(qiáng)迫應(yīng)激及慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的抑郁樣作用研究.pdf

1、目的：研究氟西汀聯(lián)合拉莫三嗪對(duì)強(qiáng)迫應(yīng)激及慢性不可預(yù)知性應(yīng)激抑郁模型中小鼠的抗抑郁樣作用及其可能的作用機(jī)制。
　　方法：（1）小鼠強(qiáng)迫應(yīng)激模型：小鼠根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)剔除不動(dòng)時(shí)間差異較大的，其余小鼠均衡隨機(jī)分為：溶劑對(duì)照組、氟西汀陽性藥對(duì)照組(10 mg/kg)、氟西汀(10 mg/kg)和拉莫三嗪(10 mg/kg)聯(lián)合用藥組。其中溶劑對(duì)照組每日灌胃等量的0.5％羧甲基纖維素鈉溶液，其余兩組按設(shè)計(jì)好的劑量灌胃氟西汀和拉莫三嗪，均連續(xù)灌胃7

2、天。采用小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中小鼠不動(dòng)時(shí)間以及曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中小鼠直立次數(shù)、穿越底面塊數(shù)和中央格停留時(shí)間作為初次篩選抗抑郁藥的指標(biāo)，對(duì)氟西汀和拉莫三嗪聯(lián)合用藥的抗抑郁作用進(jìn)行初步評(píng)價(jià)。
　　（2）小鼠慢性應(yīng)激模型：小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、氟西汀組(10 mg/kg)、氟西汀(10 mg/kg)和拉莫三嗪(10 mg/kg)聯(lián)合用藥小劑量組、氟西汀(10 mg/k g)和拉莫三嗪(20 mg/kg)聯(lián)合用藥大劑量組。除正

3、常對(duì)照組外，其余4組小鼠經(jīng)歷4周慢性不可預(yù)知性溫和應(yīng)激。應(yīng)用隨機(jī)方法將11種刺激因子隨機(jī)分配到每周7天從而建立慢性不可預(yù)知性溫和應(yīng)激模型(Chronic unpredicted mild stress，CUMS)。小鼠造模1周后開始灌胃，其中正常對(duì)照組不給予任何藥物，模型對(duì)照組每天灌胃等量的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，其他各組按預(yù)實(shí)驗(yàn)計(jì)劃量灌服氟西汀和拉莫三嗪，均連續(xù)給藥3周。于實(shí)驗(yàn)前1天（0 day，0d）、實(shí)驗(yàn)第7、14、21、28

4、天分別測(cè)量小鼠體重并記錄，同時(shí)進(jìn)行肛溫檢測(cè)和蔗糖水消耗實(shí)驗(yàn)。造模結(jié)束后，小鼠迅速脫頸椎處死并取腦組織制備相應(yīng)濃度的組織勻漿液以備含量測(cè)定。
　?。?）小鼠腦組織單胺類遞質(zhì)及抗氧化指標(biāo)檢測(cè)：通過抑制單胺遞質(zhì)去甲腎上腺素（Norepinephrine，NE）重?cái)z取實(shí)驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法(enzyme-linked immu-neosorbent assay，ELISA)檢測(cè)小鼠腦組織中5-羥色胺(5-hydroxytryptami

5、ne，5-HT)的含量，研究其抗抑郁中對(duì)單胺遞質(zhì)部分的作用機(jī)制。采用分光光度法分別檢測(cè)小鼠腦組織中抗氧化系統(tǒng)超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（Malondi-aldehyde，MDA）、谷胱甘肽（Glutathione，GSH）的含量，研究其抗抑郁中對(duì)抗氧化系統(tǒng)部分的作用機(jī)制。
　　結(jié)果：(1)小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)中，與溶劑對(duì)照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)及聯(lián)合用藥組小鼠懸尾不動(dòng)時(shí)間均顯著

6、縮短(P<0.05，P<0.01)。小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中，與溶劑對(duì)照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)和聯(lián)合用藥組小鼠強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間均顯著縮短（P<0.05，P<0.05）。小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中，與溶劑對(duì)照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)和聯(lián)合用藥組在小鼠水平活動(dòng)、直立行為和中央格停留時(shí)間上均無顯著性差異(P>0.05)。
　　(2) CUMS模型小鼠的體重在造模前1天，各組小鼠的體重基本一致，無顯著性差異(P>0.05)，具有可

7、比性；造模第7天（給藥前一天），與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組、氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠體重均顯著降低(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)；造模第14天，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組、氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥各劑量組小鼠體重降低均顯著(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)；造模第21天，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組、氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合

8、用藥各劑量組小鼠體重降低均顯著（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01）；在造模第28天，相比正常對(duì)照組，模型對(duì)照組、氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量組小鼠體重均降低顯著(P<0.01，P<0.01，P<0.01)，其中與模型對(duì)照組比較，聯(lián)合用藥大劑量組小鼠體重顯著升高(P<0.05)。
　　CUMS模型肛溫檢測(cè)中，在造模前1天，各組小鼠的肛溫基本一致，無顯著性差異(P>0.05)，具有可比性；造模第7

9、天，各組小鼠的肛溫也無顯著性差異(P>0.05)；造模第14天，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠肛溫略有下降，與模型對(duì)照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)和聯(lián)合用藥組小鼠肛溫略有升高，但均無顯著性差異(P>0.05)；造模第21天，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠肛溫顯著降低(P<0.01)，與模型對(duì)照組比較，聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠肛溫均有顯著性升高(P<0.01，P<0.01)；造模第28天，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠肛

10、溫顯著性降低(P<0.01)，與模型對(duì)照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)小鼠肛溫升高顯著(P<0.05)，聯(lián)合用藥各劑量組小鼠肛溫升高均具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.01)。
　　CUMS模型蔗糖水消耗實(shí)驗(yàn)中，造模第21天，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠的絕對(duì)蔗糖飲水量、相對(duì)蔗糖飲水量以及糖水偏愛百分比均明顯降低，但均無顯著性差異(P>0.05)，與模型對(duì)照組比較，氟西汀組(10 mg/kg)和聯(lián)合用藥小劑量和

11、大劑量組的絕對(duì)蔗糖飲水量和相對(duì)蔗糖飲水量均有升高，但均無顯著性差異(P>0.05)，其中聯(lián)合用藥小劑量組小鼠的糖水偏愛百分比升高顯著(P<0.05)；造模第28天，相比正常對(duì)照組，模型對(duì)照組小鼠絕對(duì)蔗糖飲水量降低顯著(P<0.01)、相對(duì)蔗糖飲水量顯著降低(P<0.05)，造模各組小鼠糖水偏愛百分比均有下降，其中模型對(duì)照組小鼠糖水偏愛百分比降低顯著(P<0.01)；與模型對(duì)照組相比，氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組

12、小鼠絕對(duì)蔗糖飲水量均有升高且均具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.01，P<0.01)，氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠相對(duì)蔗糖飲水量顯著升高(P<0.05，P<0.05，P<0.01)，氟西汀組(10 mg/kg)、聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠糖水偏愛百分比升高均顯著(P<0.01，P<0.01，P<0.01)。
　　(3)小鼠抑制單胺遞質(zhì)去甲腎上腺素(NE)重?cái)z取實(shí)驗(yàn)中，與溶劑對(duì)照組比較，氟西

13、汀組(10 mg/kg)的小鼠死亡率略有升高，但無顯著性差異(P>0.05)，而聯(lián)合用藥組小鼠死亡率升高具有顯著性差異(P<0.05)。小鼠腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺(5-HT)含量檢測(cè)結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，造模各組小鼠腦中5-羥色胺(5-HT)含量均有下降，其中模型對(duì)照組、氟西汀組和聯(lián)合用藥小劑量組小鼠腦中5-羥色胺(5-HT)的含量降低顯著(P<0.01，P<0.01，P<0.01)；與模型對(duì)照組比較，氟西汀組和聯(lián)合用藥

14、小劑量和大劑量組小鼠腦內(nèi)5-羥色胺(5-HT)含量均顯著升高(P<0.05，P<0.05，P<0.01)。
　　在小鼠腦組織抗氧化系統(tǒng)部分主要進(jìn)行了小鼠腦組織蛋白含量、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)四項(xiàng)含量檢測(cè)。結(jié)果顯示，相比于正常對(duì)照組，模型對(duì)照組小鼠腦內(nèi)SOD活力顯著降低(P<0.05)，MDA含量升高顯著(P<0.05)，GSH含量顯著降低(P<0.05)；與模型對(duì)照組對(duì)比，聯(lián)合用藥大劑量組小

15、鼠腦內(nèi)SOD活力升高非常明顯，其差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，聯(lián)合用藥大劑量組小鼠腦內(nèi)MDA含量顯著降低(P<0.05)，聯(lián)合用藥小劑量和大劑量組小鼠腦組織中谷胱甘肽(GSH)含量升高均非常明顯，其差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.01)。
　　結(jié)論：氟西汀聯(lián)合拉莫三嗪可顯著改善小鼠的抑郁樣行為，其抗抑郁的作用機(jī)制可能與上調(diào)腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)5-羥色胺(5-HT)和去甲腎上腺素(NE)的含量以及改善腦組織氧