大鼠骨質(zhì)疏松模型的建立及體外沖擊波對(duì)其作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis，OP)是一種以骨量低下，骨微結(jié)構(gòu)損壞，導(dǎo)致骨脆性增加，易發(fā)生骨折為特征的骨病。隨著老齡化社會(huì)的到來，骨質(zhì)疏松癥已成為威脅人類健康的重要問題，女性尤為嚴(yán)重。女性絕經(jīng)后雌激素減少及運(yùn)動(dòng)量降低都是引起骨質(zhì)疏松癥的常見原因。目前，部分絕經(jīng)后女性由于各種原因需要臥床休息，兩種因素疊加引起的骨強(qiáng)度變化情況研究較少，這正是我們關(guān)注的重點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)以4月齡雌性SD大鼠為研究對(duì)象，分別建立大鼠雙側(cè)卵巢摘除模型、大鼠吊尾

2、模型、大鼠雙側(cè)卵巢摘除合并吊尾模型，對(duì)這三種模型大鼠脛骨近端骨質(zhì)變化情況進(jìn)行橫向比較，研究由于雌激素缺乏、尾部懸吊及兩者疊加引起的骨量及骨強(qiáng)度改變情況。
　　骨質(zhì)疏松癥最嚴(yán)重的并發(fā)癥是骨質(zhì)疏松骨折，骨折常見部位是髖、脊柱、腕、踝等，降低這些部位的骨折風(fēng)險(xiǎn)將大大降低骨質(zhì)疏松癥引起的危害。研究表明力學(xué)刺激可以促進(jìn)新骨形成，從而治療骨質(zhì)疏松癥。體外沖擊波（extracorporeal shock wave，ESW）是一種具有力學(xué)特性的聲

3、波，是一種有效的力學(xué)刺激。適宜能量的沖擊波可以促進(jìn)新骨形成，因而十分適合骨質(zhì)疏松癥的局部治療。本實(shí)驗(yàn)以4月齡雌性SD大鼠為研究對(duì)象，建立大鼠雙側(cè)卵巢摘除合并吊尾骨質(zhì)疏松模型，研究體外沖擊波對(duì)該模型的作用效果及機(jī)理。
　　第一部大鼠骨質(zhì)疏松模型的建立及評(píng)價(jià)
　　目的:分別建立大鼠雙側(cè)卵巢摘除模型、大鼠吊尾模型、大鼠雙側(cè)卵巢摘除合并吊尾模型，研究由于雌激素缺乏、尾部懸吊及兩者疊加引起的骨量及骨強(qiáng)度改變情況，并進(jìn)行橫向比較。

4、>　　方法:24只4月齡雌性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（Control組）、去卵巢組（OVX組）、吊尾組（HLU組）、去卵巢合并吊尾組（OVX+HLU組），每組6只。OVX組大鼠接受雙側(cè)卵巢切除術(shù)，HLU組大鼠進(jìn)行尾部懸吊，OVX+HLU組大鼠同時(shí)進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除及尾部懸吊。吊尾后1個(gè)月處死大鼠，取左側(cè)脛骨，去除軟組織。分別對(duì)離體骨進(jìn)行Micro-CT檢測(cè)、骨密度測(cè)量、三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)、掃描電鏡觀察等。所得數(shù)據(jù)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分

5、析。
　　結(jié)果:Micro-CT顯示，HLU+OVX組BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Co.Th在四組中均是最低值，其中BV/TV、Tb.N、Co.Th較Control組分別下降43.15％(P＜0.01)、36.91％(P＜0.01)、33.33％(P＜0.05)，而Tb.Th未見明顯變化;松質(zhì)骨骨密度較Control組下降8.14％（P＜0.01）。雙能X線骨密度儀結(jié)果為與Control組相比，HLU組、OVX組、OVX+H

6、LU組整體BMD分別降低20％（P＜0.05）、24％（P＜0.05）、32％(P＜0.01)。生物力學(xué)測(cè)試顯示OVX+HLU組比Control組能承受的最大力下降24.67％(P＜0.05)。說明HLU+OVX對(duì)松質(zhì)骨的影響是減少骨小梁數(shù)量進(jìn)而引起骨量減少，對(duì)皮質(zhì)骨的影響是會(huì)引起皮質(zhì)骨厚度變薄，最終引起骨生物力學(xué)性能下降。
　　結(jié)論:OVX+HLU建立雌性大鼠骨質(zhì)疏松模型切實(shí)可行，造模時(shí)間為1個(gè)月。
　　第二部分發(fā)散式體外

7、沖擊波對(duì)大鼠骨質(zhì)疏松模型影響的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:本研究以4月齡雌性SD大鼠為研究對(duì)象，建立大鼠雙側(cè)卵巢摘除合并吊尾骨質(zhì)疏松模型，探討沖擊波對(duì)該模型的作用效果及機(jī)理，尤其是微觀結(jié)構(gòu)變化情況。
　　方法:18只4月齡雌性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（Control組）、去卵巢合并吊尾組（OVX+HLU組）、體外沖擊波治療組（ESW組），每組6只。Control組大鼠進(jìn)行假手術(shù)，OVX+HLU組大鼠同時(shí)進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除及尾部懸吊，E

8、SW組進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除及尾部懸吊后接受ESW治療。ESW治療能流密度3mJ/mm2，頻率為5Hz，每次治療1500次脈沖，每周治療1次共治療4次。1個(gè)月后處死大鼠，取左側(cè)脛骨，去除軟組織。分別對(duì)離體骨進(jìn)行Micro-CT檢測(cè)、骨密度測(cè)量、三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)、掃描電鏡觀察等。所得數(shù)據(jù)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。
　　結(jié)果:ESW組和OVX+HLU組相比，BV/TV上升了25.47％(P＜0.05)，Tb.N上升了13.50％(P＜

9、0.05)，說明OVX+HLU會(huì)引起大鼠脛骨骨小梁相對(duì)骨體積及數(shù)量的顯著下降，而ESW能明顯延緩其下降程度。但Tb.Th、Co.Th、BMD等指標(biāo)均未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。掃描電鏡的結(jié)果為Control組大鼠骨小梁連接緊密，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)未受破壞;OVX+HLU組大鼠骨小梁網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)完全被破壞，結(jié)構(gòu)紊亂，骨小梁數(shù)量明顯減少。而ESW組大鼠骨小梁結(jié)構(gòu)大致完整，部分遭到破壞，其數(shù)量及完整性介于Control組和OVX+HLU組之間。
　　結(jié)論:發(fā)散式