“少陽主骨”對去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠治療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證《內(nèi)經(jīng)》“少陽主骨”之理論?！澳I主骨”與“少陽主骨”是迥然不同的兩個觀點(diǎn)。一個著眼于臟象,后世也有廣泛的臨床應(yīng)用；一個側(cè)重于經(jīng)脈,至今對其理解和應(yīng)用仍不為眾人所知曉。本實(shí)驗(yàn)通過觀察電針體表足少陽經(jīng)穴對去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠的治療作用；從骨形成、骨吸收和細(xì)胞分子生物學(xué)等方面的變化,闡明其具有調(diào)節(jié)骨密度、改善骨質(zhì)疏松的作用,并初步探討其途徑和機(jī)制,為中醫(yī)學(xué)在以后臨床防治骨質(zhì)疏松提供一條新路徑。
　　 方法:實(shí)驗(yàn)動物12

2、月齡Wistar雌性大鼠40只,鼠體重(220±10g)。飼養(yǎng)期間動物室溫度(25±1)℃。按完全隨機(jī)化分成假手術(shù)組(Sham group),模型對照組(OVX Control group,OVX-C),電針膽經(jīng)組(OVX Acupuncture group,OVX—A),電針非經(jīng)穴組(OVX Non-point Acupuncture group,OVX-N)共4個組,每組10只。假手術(shù)組行開腹手術(shù)但不摘除卵巢,其余四組實(shí)施手術(shù)摘除雙

3、側(cè)卵巢。手術(shù)后,各組大鼠飼以正常飲食。術(shù)后3月電針膽經(jīng)組和電針非經(jīng)穴組予以行電針針刺治療。OVX-A經(jīng)穴處方:陽陵泉、環(huán)跳、懸鐘、京門。OVX-N選用大鼠后肢內(nèi)側(cè)非經(jīng)非穴處(雙側(cè))。OVX-C和Sham group不進(jìn)行針刺。干預(yù)3月后,抽提左股骨總RNA,采用半定量:RT-PCR法檢測骨細(xì)胞中OPG、RANKL和CBFA1mRNA表達(dá)的變化。雙能X線檢測右股骨的骨密度。收集24h空腹尿液檢測尿脫氧吡啶啉。心臟取血,采用酶聯(lián)免疫法檢測:

4、血清Ⅰ型前膠原氨基末端肽、血清Ⅰ型膠原交聯(lián)氨基末端肽、血清骨鈣素。
　　 結(jié)果:1.造模3月且干預(yù)3月后,OVX-N和OVX-C中BMD體重校正值較OVX-A和Sham group顯著下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；而OVX-A與Shamgroup；OVX-N與OVX-C之間卻無顯著性差異(P>0.05)。2.造模3月且干預(yù)3月后,OVX-N和OVX-C中OPGmRNA的表達(dá)較OVX-A和Shamgroup明顯下降,差異

5、有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而OVX-A與Sham group；OVX-N與OVX-C之間卻無顯著性差異(P>0.05)。3.造模3月且干預(yù)3月后,OVX—C中RANKLmRNA的表達(dá)較Sham group明顯增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；OVX-A中RANKLmRNA的表達(dá)較OVX-N和OVX-C的值明顯降低,均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與假手術(shù)組卻無顯著性差異(P>0.05)。4.造模3月且干預(yù)3月后,OVX-N和O

6、VX-C中OPG/RANKLmRNA的表達(dá)較Sham group顯著下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；而前二者之間卻無顯著性差異。OVX-A中OPG/RANKLmRNA的表達(dá)較OVX-N和OVX-C的值顯著升高,均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；與Sham group卻無顯著性差異(P>0.05)。5.造模3月且干預(yù)3月后,OVX—A和OVX-N中CBFA1mRNA的表達(dá)較Sham group明顯下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05

7、)；OVX-C中CBFA1mRNA的表達(dá)較Sham group顯著下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；而前三者之間卻無顯著性差異。6.造模3月且干預(yù)3月后,OVX-C中DPD的含量較OVX-A、OVX-N和Sham group明顯增高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而后三者之間卻無顯著性差異(P>0.05)。7.造模3月且干預(yù)3月后,NTX指標(biāo)各組間無顯著差異(P>0.05)。8.造模3月且干預(yù)3月后,OVX-N和OVX-C中P

8、INP的含量較Sham group明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；OVX-A中PINP的含量與Sham group相比卻無顯著性差異(P>0.05)。9.造模3月且干預(yù)3月后,BGP指標(biāo)各組間無顯著差異(P>0.05)。
　　 結(jié)論:一、電針足少陽膽經(jīng)穴能提高去卵巢大鼠的BMD體重校正值,使其與假手術(shù)組無差異,有治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的作用,其主要作用可能通過如下途徑:1.電針針刺足少陽膽經(jīng)穴治療過程中具有促進(jìn)骨形成及抑

9、制骨吸收的雙向調(diào)節(jié)作用,以達(dá)到防治去勢大鼠骨質(zhì)疏松的目的?？墒筄VX-A.中OPGmRNA、OPG/RANKLmRNA的表達(dá)增加而促進(jìn)骨形成；并且使RANKLmRNA的表達(dá)降低而抑制骨吸收。2.通過電針針刺足少陽膽經(jīng)穴治療后可從多途徑、多靶點(diǎn)使去勢大鼠引起的內(nèi)分泌、骨代謝指標(biāo)的變化等接近正常水平,達(dá)到防治骨質(zhì)疏松的作用。為臨床預(yù)防和治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥提供理論依據(jù)。其表現(xiàn)為:通過電針針刺治療后可以降低OVX-A中尿DPD的含量,并能提高