復(fù)方石淋通膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升及其防潮工藝研究.pdf

1、目的：優(yōu)化及提升復(fù)方石淋通膠囊薄層鑒別和含量測(cè)定的質(zhì)控方法，并對(duì)其水提醇沉工藝、噴霧干燥包衣工藝進(jìn)行研究，為復(fù)方石淋通膠囊的質(zhì)量控制及防潮工藝的研究奠定基礎(chǔ)。
　　方法：1）采用硅膠HSGF254薄層板，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（3:3:1:1）為展開(kāi)劑，三氯化鋁為顯色劑，對(duì)制劑中的夏佛塔苷、綠原酸進(jìn)行薄層鑒別；借助D101大孔樹(shù)脂對(duì)制劑中的馬錢苷進(jìn)行分離、富集，10％硫酸乙醇為顯色劑，采用相同的展開(kāi)劑對(duì)其進(jìn)行薄層鑒別。2）采用

2、反相高效液相色譜法，以Boston C18柱（250×4.6 mm，5μm）為色譜柱，乙腈-0.1%甲酸溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，流速1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為335nm，柱溫30℃，分別建立復(fù)方石淋通膠囊的指紋圖譜及含量測(cè)定方法。3）運(yùn)用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)》（2004A版）軟件對(duì)指紋圖譜進(jìn)行整體相似度評(píng)價(jià)，MVSP3.1(Multivariate Statistical Package)、SIMCA13.0軟件對(duì)其共

3、有色譜峰相對(duì)峰面積分別進(jìn)行聚類分析、主成分分析，評(píng)價(jià)指紋圖譜的一致性。通過(guò)比對(duì)復(fù)方石淋通膠囊、單味藥材和對(duì)照品色譜峰的保留時(shí)間、紫外吸收譜圖確定指紋峰的藥材歸屬及特征峰的指認(rèn)。比較20批不同廠家、不同批次膠囊劑/片劑中藥效指標(biāo)成分（綠原酸、夏佛塔苷及異夏佛塔苷）的含量，對(duì)其質(zhì)量?jī)?yōu)劣進(jìn)行評(píng)價(jià)。4）運(yùn)用正交試驗(yàn)，采用兩種評(píng)價(jià)指標(biāo)（評(píng)價(jià)指標(biāo)Ⅰ：綠原酸、夏佛塔苷的含量及出膏率；評(píng)價(jià)指標(biāo)Ⅱ：HPLC特征指紋峰的單位質(zhì)量峰面積及出膏率）考察溶劑倍數(shù)

4、、提取時(shí)間、醇沉濃度3個(gè)因素對(duì)提取效果的影響，并通過(guò)單因素試驗(yàn)考察提取次數(shù)對(duì)轉(zhuǎn)移率的影響。應(yīng)用層次分析法確定各指標(biāo)權(quán)重系數(shù)，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。5）比較綠原酸和夏佛塔苷轉(zhuǎn)移率，考察兩種提取工藝中有效成分含量的差異；采用苯酚-硫酸法測(cè)定兩種提取工藝的浸膏粉中多糖的含量；提高新提取工藝的醇沉濃度，降低多糖含量，對(duì)浸膏粉吸濕的影響。6）運(yùn)用單因素試驗(yàn)，以吸濕率為評(píng)價(jià)指標(biāo)篩選處方，確定主藥及包衣粉的用量；優(yōu)化噴霧干燥的儀器參數(shù)，考察不同的進(jìn)

5、樣速度、進(jìn)口溫度、干燥空氣流量對(duì)樣品的收率、含水量及吸濕率的影響，以及不同的霧化壓力對(duì)樣品的收率、堆密度及顆粒粒徑的影響。 結(jié)果：1）以綠原酸、夏佛塔苷、馬錢苷為指標(biāo)建立的薄層方法，能有效地對(duì)復(fù)方石淋通膠囊進(jìn)行定性鑒別。2）標(biāo)定了指紋圖譜的13個(gè)特征峰，確定了11個(gè)特征峰的藥材歸屬，確定第7號(hào)峰、12號(hào)峰、13號(hào)峰分別為綠原酸、夏佛塔苷、異夏佛塔；膠囊劑（天奇中蒙、德康）各批次的相似度在0.8以上，片劑（吉祥春、羅浮山）各批次指紋

6、峰有缺失，相似度在0.5以下；通過(guò)聚類及主成分分析將樣品聚為4類，其中1、9、10、11、13號(hào)峰對(duì)評(píng)價(jià)樣品的質(zhì)量有顯著性的影響。3）綠原酸、夏佛塔苷、異夏佛塔苷分別在1.49~115.98μg/ml（r=0.9997）、1.34~104.76μg/ml（r=0.9999）、1.31~54.72μg/ml（r=0.9999）濃度范圍內(nèi)線性良好；平均回收率分別為97.44%、100.5%、101.9%；精密度、穩(wěn)定性和重復(fù)性的RSD均小于

7、3%；每粒/每片中綠原酸、夏佛塔苷和異夏佛塔苷的含量分別為0.36~1.66mg、0.06~1.52mg、0.02~1.10mg，其含量不僅具有較大的差異，且羅浮山廠家的兩批樣品中綠原酸、吉祥春廠家的一批樣品中夏佛塔苷、異夏佛塔苷均未檢測(cè)到。4）兩種評(píng)價(jià)指標(biāo)篩選復(fù)方石淋通膠囊的提取工藝所得結(jié)果一致，優(yōu)化的最佳提取工藝為：第一次加10倍量水，第二次加6倍量水，提取2次，每次1h，濃縮至相對(duì)密度1.02（60℃），加入無(wú)水乙醇至醇沉濃度80

8、%。5）新工藝的綠原酸和夏佛塔苷轉(zhuǎn)移率明顯高于原工藝，多糖含量低于原工藝，新工藝的吸濕性略有降低。6）噴霧干燥的最佳儀器參數(shù)為：進(jìn)樣速度6.72ml/min、進(jìn)口溫度150℃、霧化壓力2.3bar、干燥空氣流量4.1m/s；包衣后樣品的吸濕性明顯低于未包衣樣品，且包衣樣品吸濕后仍保持粉末狀態(tài)。
　　結(jié)論：
　　1）本研究在原質(zhì)控指標(biāo)綠原酸的基礎(chǔ)上，新建立的薄層鑒別（夏佛塔苷、馬錢苷）、含量測(cè)定（夏佛塔苷、異夏佛塔苷）及指紋圖

9、譜測(cè)定方法均具有較好的重復(fù)性，從定性和定量?jī)煞矫娓行У貙?duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制，為進(jìn)一步提升及完善該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。
　　2）本研究?jī)?yōu)化的提取工藝與原工藝相比，提取時(shí)間縮短，指標(biāo)成分含量增加，工藝穩(wěn)定，能保證復(fù)方石淋通膠囊組方藥材中有效成分的提取，可適用于工業(yè)生產(chǎn)。
　　3）依據(jù)多糖吸濕假說(shuō)，提高提取工藝的醇沉濃度，降低多糖含量，浸膏粉的吸濕性略有降低。另外，借助噴霧干燥技術(shù)在浸膏粉表面形成聚合物薄膜，將其微囊化，阻礙外界