異菝葜皂苷元抗氧化應(yīng)激損傷的神經(jīng)細胞保護作用及機制研究.pdf

1、氧化應(yīng)激與包括神經(jīng)退行性疾?。╪eurodegenerative diseases，NDD）在內(nèi)的眾多人類疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。異菝葜皂苷元（smilagenin,SMI）是來源于知母的脂溶性小分子甾體皂苷元。前期研究證明其為治療NDD的潛在有效藥物，但關(guān)于SMI是否具有針對氧化應(yīng)激損傷的神經(jīng)保護潛能還未可知。本文建立氧化應(yīng)激損傷細胞模型，對SMI抗氧化應(yīng)激能力進行檢測，并初步探討SMI抗過氧化氫(hydrogen peroxide,

2、H2O2)氧化損傷可能涉及的分子作用機制。
　　首先我們以SH-SY5Y及 PC12細胞為研究對象，研究SMI對H2O2或氯化鈷（cobalt chloride，CoCl2）損傷細胞的神經(jīng)保護作用。MTT結(jié)果顯示,SMI預(yù)處理濃度依賴的提高了H2O2損傷SH-SY5Y及PC12細胞存活率，但對于CoCl2損傷的細胞則無明顯影響。形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)SMI預(yù)處理顯著的改善H2O2損傷SH-SY5Y細胞的形態(tài)。接著我們對SMI抗H2O2氧化

3、損傷SH-SY5Y細胞的分子作用機制展開研究。ROS檢測結(jié)果表明，SMI顯著抑制H2O2導(dǎo)致的細胞內(nèi)ROS水平異常升高；Western Blot結(jié)果顯示，H2O2處理誘導(dǎo)細胞內(nèi)p-Akt/Akt和HSP70表達，但SMI預(yù)孵育進一步提高了p-Akt/Akt和HSP70的表達水平，使用PI3K抑制劑阻斷Akt磷酸化后，HSP70的誘導(dǎo)表達幾乎被完全阻斷，但本實驗條件下HSP90的表達并不被影響。
　　綜上所述，我們的研究首次表明SM