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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察健脾化瘀法中藥對(duì)人類肝癌細(xì)胞株SMMC-7721增殖、侵襲遷移能力的影響。
方法:
根據(jù)血清藥理學(xué)研究原理,用經(jīng)健脾化瘀法中藥水煎劑灌胃的Wistar大鼠的含藥血清以及未經(jīng)中藥灌胃的正??瞻籽?,對(duì)人類肝癌細(xì)胞株SMMC-7721進(jìn)行體外培養(yǎng),進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中對(duì)照組給予含有10%正常血清細(xì)胞培養(yǎng)基,實(shí)驗(yàn)組給予含有10%、20%含藥血清細(xì)胞培養(yǎng)基。
?、偻ㄟ^CCK-8法比色實(shí)驗(yàn)分別對(duì)培
2、養(yǎng)48h、72h后的對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),計(jì)算其吸光度OD值以及細(xì)胞增殖抑制率,三組間均數(shù)分析使用單因素方差分析,兩兩組間分析運(yùn)用LSD分析,兩組相關(guān)數(shù)據(jù)間比較使用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)方法,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;觀察健脾化瘀法中藥對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721的增殖抑制作用。
?、谕ㄟ^細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)測(cè)量并計(jì)算24h、48h后的對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的細(xì)胞遷移速率、遷移抑制率,三組間均數(shù)分析使用單因素方差分析,兩兩組間分析運(yùn)用L
3、SD分析,兩組相關(guān)數(shù)據(jù)間比較使用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)方法,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;觀察健脾化瘀法中藥對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721遷移能力的抑制作用。
?、弁ㄟ^Transwell侵襲性實(shí)驗(yàn)觀察并計(jì)算24h、48h后的對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組發(fā)生侵襲的細(xì)胞個(gè)數(shù)和侵襲抑制率,三組間均數(shù)分析使用單因素方差分析,兩兩組間分析運(yùn)用LSD分析,兩組相關(guān)數(shù)據(jù)間比較使用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)方法,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;觀察健脾化瘀法中藥對(duì)肝癌細(xì)胞SMM
4、C-7721侵襲能力的抑制作用。
結(jié)果:
①CCK-8法結(jié)果:健脾化瘀法中藥對(duì)SMMC-7721的增殖具有抑制作用,在給藥后48h,20%含藥組與10%正常組比較OD值明顯降低(P<0.05);在給藥后72h,10%、20%含藥血清組OD值較10%正常血清組均明顯降低(P<0.05);在給藥后48h、72h后,20%含藥血清組的增殖抑制率均明顯高于10%含藥血清組(P<0.05);比較20%含藥血清在給藥72h后的抑
5、制率較48h時(shí)明顯增高。
?、诩?xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn):在給藥后24h、48h,10%含藥、20%含藥與10%正常比較愈合速率均明顯降低(P<0.05);20%含藥濃度下,24h與48h的遷移速率明顯降低(P<0.05);在給藥48h后,20%含藥血清對(duì)遷移的抑制率較10%含藥血清明顯增高(P<0.05)。
③在Transwell侵襲性實(shí)驗(yàn):在給藥48h后20%、10%含藥血清組與10%正常血清組比較,發(fā)生侵襲的細(xì)胞數(shù)均明顯減少(
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