CDKs對人肝癌細胞SMMC7721的影響.pdf

1、目的: 探討細胞周期蛋白依賴激酶（cyclin dependent kinases，CDKs）對原發(fā)性肝癌（肝癌）細胞生長、增殖、細胞周期時相分布、凋亡的影響及可能的作用機制。 方法: 對體外培養(yǎng)的肝癌細胞株SMMC-7721分別予濃度為0μ mol/L、2μ mol/L、4μ mol/L、8μ mol/L、16μ mol/L、32μ mol/L CDKs抑制劑Roscovitine干預72 h，分別通過倒置顯微

2、鏡、四甲基偶氮唑藍法、流式細胞儀、逆轉(zhuǎn)錄PCR法觀察SMMC-7721細胞的生長、增殖，細胞周期時相的分布、凋亡以及CDK2、Caspase-3和BCL-2 mRNA的表達。 結(jié)果: Roscovitine干預72 h后，光鏡下可見隨著Roscovitine濃度的增加，部分細胞核固縮、胞體折光性減弱、胞漿內(nèi)可見有顆粒和核碎片形成，其中以32μmol/L組的改變最為明顯。四甲基偶氮唑藍法結(jié)果顯示，不同濃度的Roscovi

3、tine對細胞生長均有一定的抑制作用，Roscovitine對細胞的抑制作用呈劑量依賴性和時間依賴性。流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)，經(jīng)Roscovitine干預后肝癌細胞G0期、G1期及凋亡細胞的比例增加。逆轉(zhuǎn)錄PCR發(fā)現(xiàn)，隨著Roscovitine濃度的增加，CDK2 mRNA及凋亡相關(guān)基因BCL-2 mRNA水平降低，Caspase-3 mRNA表達升高。 結(jié)論: CDKs表達降低可抑制增殖期肝癌細胞的生長、增殖，改變肝癌細