mir-148a抑制肝癌細(xì)胞7721侵襲遷移的作用研究.pdf

1、原發(fā)性肝癌是肝細(xì)胞或肝內(nèi)膽管上皮發(fā)生的惡性腫瘤。盡管其治療方法有了很大進(jìn)步，但其復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移仍十分常見(jiàn)。因此，探索肝癌侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制，尋找新的臨床治療靶點(diǎn)，在肝癌的治療中具有重要作用。
　　microRNA是一些細(xì)胞程序的調(diào)節(jié)因子，研究發(fā)現(xiàn)人類(lèi)肝癌/肝癌伴轉(zhuǎn)移組織中miRNAs存在差異表達(dá)，因而，探索miRNAs與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性的影響很有必要。
　　目的:檢測(cè)肝癌/肝癌伴轉(zhuǎn)移組織中差異表達(dá)的miRNAs，觀(guān)察miR-1

2、48a與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系，為肝癌的基因治療提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:應(yīng)用miRNA芯片技術(shù)檢測(cè)肝癌/肝癌伴轉(zhuǎn)移組織中差異表達(dá)的miRNAs，篩選差異表達(dá)的miRNAs;
　　利用Transwell小室法和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)肝癌細(xì)胞侵襲與遷移能力;
　　采用明膠酶譜法及蛋白免疫印記法(Western blot)檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)的表達(dá)情況，進(jìn)而，分析其與肝癌侵襲和轉(zhuǎn)移的

3、關(guān)系。
　　結(jié)果:miRNA芯片技術(shù)結(jié)果顯示miR-148a在肝癌伴轉(zhuǎn)移組織中顯著下調(diào)，半定量RT-PCR結(jié)果顯示，和對(duì)照組相比，LV-miR-148a感染組肝癌細(xì)胞表達(dá)miR-148a明顯增高，Transwell小室法及細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示過(guò)表達(dá)miR-148a明顯抑制肝癌細(xì)胞7721侵襲遷移能力，明膠酶譜法與Western blot結(jié)果顯示過(guò)表達(dá)miR-148a降低肝癌細(xì)胞7721中MMP-2和MMP-9蛋白的表達(dá)。