版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的:研究肝癌中miR-139-5P與轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)之間的表達關系,分析TGF-β1是否是miR-139-5P的靶基因,闡明miR-139-5P靶向TGF-β1調(diào)控上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關信號通路,抑制肝癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移的分子機制。
方法:首先通過生物信息學方法,發(fā)現(xiàn)20個miRNAs可能是 TGF-β1的潛在靶miRNAs;進一步計算分析后發(fā)現(xiàn),miR-139-5P是TGF-β1的最佳結(jié)合靶miRNA。在5
2、6例肝癌組織和20例癌旁組織中,通過免疫組化檢測TGF-β1的表達水平;通過qRT-PCR檢測miR-139-5P的表達,Western blot檢測TGF-β1的表達,分析兩者之間的表達相關性;在高轉(zhuǎn)移和低轉(zhuǎn)移的肝癌細胞株中,qRT-PCR檢測miR-139-5P的表達,Western blot檢測TGF-β1、N-cadherin、Vimentin表達,分析miR-139-5P和三個蛋白表達之間的關系;在重組細胞株HepG2-miR
3、-139-5p mimics、HepG2-miR-Scramble、HepG2-miR-139-5p-PM、HepG2中,qRT-PCR檢測miR-139-5P的表達,western blot檢測TGF-β1的表達,分析miR-139-5P表達是否與TGF-β1的3` UTR端結(jié)合;Transwell方法檢測miR-139-5P表達改變后的肝癌重組細胞系侵襲能力的改變。
結(jié)果:(1)生物信息學方法發(fā)現(xiàn)與TGF-β1結(jié)合的靶mi
4、RNAs有20個;其中,miR-139-5p是與TGF-β1的結(jié)合穩(wěn)定性最高,特異性最好的靶miRNA。
?。?)肝癌組織中TGF-β1表達陽性率為80.4%(45/56),癌旁正常肝組織中表達陽性率為15.0%(3/20),兩者之間的陽性率比較有顯著性差異(P<0.01)。(3)肝癌組織中miR-139-5p低表達,而癌旁組織中miR-139-5p高表達,兩者之間的差異有統(tǒng)計學(P<0.01);肝癌組織中TGF-β1高表達,癌
5、旁組織中低表達,兩者之間的差異有統(tǒng)計學(P<0.01)。miR-139-5p和TGF-β1表達之間存在負相關。
?。?)高轉(zhuǎn)移細胞株MHCC97-H中miR-139-5p低表達,低轉(zhuǎn)移細胞株MHCC97-L中miR-139-5p高表達,兩者之間的表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);高轉(zhuǎn)移細胞株 MHCC97-H中 TGF-β1、N-cadherin、Vimentin均高表達,低轉(zhuǎn)移細胞株MHCC97-L中TGF-β1、N-ca
6、dherin、Vimentin低表達,三個蛋白的表達水平在不同轉(zhuǎn)移細胞系中有顯著性差異(P<0.01)。
?。?)HepG2-miR-139-5p mimics細胞株中miR-139-5p水平表達增高,而TGF-β1表達水平下調(diào)(P<0.05);而在HepG2-miR-Scramble、HepG2-miR-139-5p-PM、HepG2三個細胞株中,miR-139-5p表達水平無明顯差異,TGF-β1表達水平也沒有明顯差異。mi
7、R-139-5p能和TGF-β1的3`UTR位點結(jié)合。
?。?)miR-139-5p高表達細胞株中侵襲細胞計數(shù)明顯低于其他三組(P<0.01),HepG2-miR-Scramble、HepG2-miR-139-5p-PM、HepG2三個細胞株中 miR-139-5p表達水平無明顯差異,他們之間侵襲細胞計數(shù)也無顯著性差異(P>0.05)。
結(jié)論:(1)TGF-β1在肝癌組織中表達增高,與肝癌發(fā)病有關。
?。?)肝
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- miR-144靶向ROCK1抑制肝癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究.pdf
- MiR-1271靶向FOXQ1抑制胃癌細胞增殖、侵襲和EMT.pdf
- miR-101靶向調(diào)節(jié)Girdin表達抑制肝癌細胞增殖及侵襲轉(zhuǎn)移研究.pdf
- LincRNa-p21通過抑制Notch信號誘導的EMT抑制肝癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移.pdf
- miR-149-5p抑制肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的實驗研究.pdf
- miR-335靶向ALDH1A1調(diào)控腎癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移的機制研究.pdf
- 電針控瘤效應的miR-409-5p靶向抑制TGF-β1分子調(diào)控機制研究.pdf
- TGF-β1對胰腺癌細胞EMT及侵襲性的影響.pdf
- miR-146b-5p抑制胰腺癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究.pdf
- miR-139-5p在高糖內(nèi)皮細胞損傷中的作用.pdf
- Hsa-microRNA-138-5p靶向調(diào)控FOXC1和Vimentin抑制胰腺癌細胞增殖及侵襲轉(zhuǎn)移.pdf
- miR-139-5p與結(jié)腸癌細胞生物學功能的關聯(lián)研究.pdf
- miR-335靶向調(diào)控ROCK1抑制骨肉瘤細胞侵襲轉(zhuǎn)移的研究.pdf
- MiR-18a靶向Dicer1促進肝癌細胞的侵襲遷移.pdf
- miR-29a-3p靶向IGF-1抑制食管鱗癌細胞增殖、遷移及侵襲.pdf
- Hsa-miR-486-5p抑制肝癌細胞增殖及侵襲的作用及機制研究.pdf
- MiR-3620-3p靶向調(diào)控lncRNA-TUBB2A抑制胃癌細胞增殖、侵襲的機制研究.pdf
- MiR-188-5p靶向AAC11抑制肝細胞癌生長和侵襲轉(zhuǎn)移的研究.pdf
- miR-486-5p靶向SIRT1抑制肝癌干細胞功能的相關研究.pdf
- miR-218抑制宮頸癌細胞EMT、侵襲遷移及其機制研究.pdf
評論
0/150
提交評論