HBeAg-HBeAb早發(fā)血清學(xué)轉(zhuǎn)換患者病毒學(xué)和免疫遺傳學(xué)的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、據(jù)世界衛(wèi)生組織最新統(tǒng)計(jì)，全世界大約有2.4億人感染乙型肝炎病毒(Hepatitis Bvirus，HBV)，研究表明慢性乙型肝炎患者每年內(nèi)約有2％～6％逐漸發(fā)展為肝硬化、肝癌，每年大約有65萬(wàn)人死于慢性乙型肝炎。目前慢性HBV感染的自然史分為4個(gè)階段，包括免疫耐受期(Immune tolerant phase)、免疫清除期(Immune clearancephase)、非活動(dòng)復(fù)制期(Inactive phase)和再活動(dòng)期(Reacti

2、vation phase)。HBeAg自然轉(zhuǎn)換需經(jīng)歷一個(gè)漫長(zhǎng)的時(shí)期，而抗病毒治療的HBeAg轉(zhuǎn)換率也只有40％左右[8-12]，離我們理想的轉(zhuǎn)換率還有一定的差距。病毒的變異影響著病毒的表達(dá)和復(fù)制，最常見(jiàn)的即為前C區(qū)和BCP區(qū)變異，前C區(qū)變異常見(jiàn)為G1896A突變后形成了一個(gè)新的終止密碼子，從而使HBeAg的表達(dá)被終止。BCP區(qū)最常見(jiàn)的變異是A1762T和G1764A的雙點(diǎn)突變，通過(guò)降低前C區(qū)mRNA的轉(zhuǎn)錄水平從而減少HBeAg合成。多項(xiàng)

3、全基因組關(guān)聯(lián)研究（Genome-wide association study,GWAS）證明了HLA-DP/DQ、IL28B在HBV持續(xù)感染和清除過(guò)程中有著顯著的相關(guān)性。
　　慢性HBV感染的進(jìn)程和結(jié)局受到病毒因素(PC/BCP)和宿主因素(HLA-DP/DQ、IL28B)兩方面的影響，但是自發(fā)HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換的免疫遺傳學(xué)機(jī)制尚不清楚。目前也還沒(méi)有針對(duì)HBeAg轉(zhuǎn)換的大樣本隊(duì)列GWAS研究，所以，我們前瞻性的收集了低年齡HBe

4、Ag未轉(zhuǎn)換（年齡小于20歲，HBeAg陽(yáng)性）、低年齡HBeAg轉(zhuǎn)換（年齡小于20歲，HBeAg陰性）、高年齡HBeAg轉(zhuǎn)換（年齡大于50歲，HBeAg陰性）和高年齡HBeAg未轉(zhuǎn)換（年齡大于50歲，HBeAg陽(yáng)性）四組病例樣本，通過(guò)對(duì)PC/BCP變異和HLA-DP/DQ、IL28B基因多態(tài)性的分析，從病毒和宿主兩個(gè)方面對(duì)HBeAg早發(fā)血清學(xué)轉(zhuǎn)換進(jìn)行研究，希望能進(jìn)一步證明HLA-DP/DQ、IL28B單核苷酸多態(tài)性及PC/BCP變異與HB

5、eAg早發(fā)/遲發(fā)血清學(xué)轉(zhuǎn)換的關(guān)系。
　　我們的主要研究結(jié)果如下:
　　1.第一階段收集CHB患者共437例，低年齡HBeAg未轉(zhuǎn)換組106例，低年齡HBeAg轉(zhuǎn)換組179例，高年齡HBeAg轉(zhuǎn)換組90例及高年齡HBeAg未轉(zhuǎn)換組62例。低年齡HBeAg轉(zhuǎn)換組男性患者比例明顯高于高年齡HBeAg未轉(zhuǎn)換組(65.9％ vs46.7％)。患者進(jìn)入免疫清除期的機(jī)率明顯高于再活動(dòng)期(23.7％，35.5％ vs9.5％)，ALT在正常

6、范圍內(nèi)時(shí)比較四組病例的ALT和HBV DNA，HBeAg陽(yáng)性組均顯著高于HBeAg陰性組(24.1±8.33，6.9±1.2 vs20.6+8.7，4.2±1.3)。HBeAg陰性患者中，高年齡段的HBV DNA陽(yáng)性率為42.2％，明顯高于低年齡患者的18.4％（x2=17.4，P＜0.05）。
　　2.低年齡HBeAg未轉(zhuǎn)換組，全為野生型，并未發(fā)生PC或BPC位點(diǎn)突變;低年齡HBeAg轉(zhuǎn)換組，PC區(qū)變異占69％;但BCP雙位點(diǎn)突

7、變及野生型，仍占約25％;高年齡HBeAg轉(zhuǎn)換組，BCP區(qū)變異和野生型分別占了24％和17％;。高年齡HBeAg未轉(zhuǎn)換組，有6例(11％)患者雖然發(fā)生了PC區(qū)變異，但仍然表現(xiàn)為HBeAg持續(xù)陽(yáng)性。高年齡HBeAg陽(yáng)性患者，PC/BCP變異型與野性型相比，在年齡、性別、ALT、HBV DNA及HBsAg水平均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。BCP突變型HBeAg滴度顯著低于野生型患者(t=-3.1，P＜0.05)。PC突變型HBeAg滴度低于野生型患者，但

8、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(t=-1.4，P＞0.05)。
　　3.HBV持續(xù)陽(yáng)性患者rs12979860 T和rs8099917 G等位頻率(9.0％，8.5％)顯著高于早發(fā)轉(zhuǎn)換患者(3.4％，3.3％)(P=1.45×10-4，P=3.15×10-4)，為危險(xiǎn)等位。IL28Brs12979860 CC和rs8099917 TT基因型與慢性HBV患者HBeAg早發(fā)血清學(xué)轉(zhuǎn)換顯著關(guān)聯(lián)(rs12979860, p=8.74×10-4; rs809

9、9917, p=2.15×10-3); IL28B rs8099917、rs12979860GT單倍型與HBeAg持續(xù)陽(yáng)性患者顯著關(guān)聯(lián)(P=2.39×10-3)，IL28B rs8099917、rs12979860 TC單倍型與HBeAg早發(fā)血清學(xué)發(fā)轉(zhuǎn)換患者顯著關(guān)聯(lián)(P=2.39×10-3)。
　　4.HLA-DP/DQ與HBeAg自發(fā)血清學(xué)轉(zhuǎn)換并無(wú)明顯的相關(guān)性。
　　總之，本研究通過(guò)PC/BCP變異實(shí)驗(yàn)證明了病毒變異能降低