Xpert MTB-RIF檢測(cè)非呼吸系統(tǒng)標(biāo)本中結(jié)核分枝桿菌及其利福平耐藥性研究.pdf

1、目的:肺外結(jié)核的診斷一直是困擾臨床的難題。臨床上，肺外結(jié)核病變部位分散且病灶結(jié)核菌量少，傳統(tǒng)的涂片、培養(yǎng)陽(yáng)性率低，耗時(shí)長(zhǎng)，常不能滿足臨床快速診斷和及時(shí)治療的需求。Xpert MTB/RIF為一種新型的分子診斷技術(shù)，其以結(jié)核分枝桿菌特異的rpoB基因中長(zhǎng)度為81bp的利福平耐藥決定區(qū)為靶基因，可在2h同時(shí)對(duì)結(jié)核分枝桿菌和利福平耐藥進(jìn)行檢測(cè)。本文應(yīng)用該技術(shù)對(duì)疑似肺外結(jié)核患者的非呼吸系統(tǒng)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，探討其對(duì)肺外結(jié)核的診斷價(jià)值，以期為其在我國(guó)

2、臨床上的應(yīng)用提供參考。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)從2014年4月到2015年3月在北京胸科醫(yī)院收集疑似肺外結(jié)核住院患者的非呼吸系統(tǒng)標(biāo)本328份，對(duì)這些標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行Xpert MTB/RIF、培養(yǎng)和涂片檢測(cè)，并對(duì)培養(yǎng)陽(yáng)性的標(biāo)本進(jìn)行傳統(tǒng)藥敏檢測(cè)?；仡櫺允占鄳?yīng)患者的病歷資料，以綜合診斷為標(biāo)準(zhǔn)，探討Xpert MTB/RIF對(duì)肺外結(jié)核的診斷價(jià)值，并與傳統(tǒng)的培養(yǎng)和涂片進(jìn)行比較。以傳統(tǒng)的藥敏試驗(yàn)為金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)價(jià)XpertMTB/RIF對(duì)利福平耐藥檢測(cè)

3、的敏感性和特異性，并對(duì)利福平耐藥突變特點(diǎn)進(jìn)行分析。對(duì)Xpert和傳統(tǒng)藥敏檢測(cè)結(jié)果不一致的標(biāo)本菌株進(jìn)行測(cè)序分析，以驗(yàn)證Xpert MTB/RIF檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
　　結(jié)果:
　　1328份標(biāo)本中，膿液248份(221份(89.1％)來(lái)源于骨關(guān)節(jié)病灶），胸水63份，腦脊液17份。以綜合診斷為標(biāo)準(zhǔn)，Xpert MTB/RIF對(duì)標(biāo)本總體檢測(cè)的敏，感性和特異性分別為64.1％(195/304)和100％(24/24)，敏感性明顯高于培養(yǎng)

4、(313％)和涂片(19.7％)。Xpert在涂陽(yáng)培陽(yáng)、涂陽(yáng)培陰和涂陰培陽(yáng)標(biāo)本中檢測(cè)的敏感性分別為100％、100％和91.7％，在涂陰培陰但綜合診斷為肺外結(jié)核的患者標(biāo)本中，Xpert檢測(cè)的敏感性為43.5％。
　　2各亞組標(biāo)本中，Xpert系統(tǒng)對(duì)膿液檢測(cè)的敏感性為75.1％(175/233)，對(duì)胸水和腦脊液檢測(cè)的敏感性分別為30.9％(17/55)和18.8％(3/16)。
　　3 Xpert系統(tǒng)檢測(cè)標(biāo)本結(jié)核菌含量的結(jié)果中

5、，胸水和腦脊液結(jié)核菌含量極低和低水平所占的比例分別為94.1％(16/17)和100(3/3)，膿液中結(jié)核菌含量極低和低水平所占的比例為78.3％(149/175)。
　　4以傳統(tǒng)藥敏試驗(yàn)為金標(biāo)準(zhǔn)，Xpert檢測(cè)利福平耐藥的敏感性為80％(12/15)，特異性為100％(75/75)，兩種方法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。對(duì)3份傳統(tǒng)藥敏試驗(yàn)檢測(cè)為利福平耐藥但Xpert為利福平敏感的標(biāo)本的分離菌株進(jìn)行測(cè)序，發(fā)現(xiàn)這3株分離菌株

6、的利福平耐藥決定區(qū)均未發(fā)生突變，測(cè)序結(jié)果與Xpert檢測(cè)結(jié)果一致。Xpert系統(tǒng)檢測(cè)陽(yáng)性的195例標(biāo)本中，利福平耐藥有29例（耐藥率為14.87％），其中發(fā)生突變而未產(chǎn)生熒光的E探針21份(72.4％)，D探針5份(17.2％)，B探針2份(6.9％)，A探針2份(6.9％)。
　　結(jié)論:Xpert MTB/RIF較高的特異性在確診結(jié)核病方面具有較高的價(jià)值。亞組中，Xpert在骨關(guān)節(jié)結(jié)核診斷方面具有較高的價(jià)值。Xpert MTB/