Cathelicidin相關(guān)抗菌肽(CRAMP)在炎性腸病及哮喘小鼠模型中的免疫調(diào)控作用與機(jī)制.pdf

1、Cathelicidin是一類廣泛存在于脊椎動(dòng)物體內(nèi)的生物活性多肽，不同物種來(lái)源的家族成員cathelin區(qū)域高度保守。人與小鼠只發(fā)現(xiàn)一種Cathelicidin，分別命名為L(zhǎng)L-37與CRAMP，兩者在結(jié)構(gòu)、功能和組織分布等方面極為相似。針對(duì)LL-37/CRAMP的研究主要集中于其廣譜抗微生物活性，顯示其在抗感染中發(fā)揮直接殺傷、抑制作用。近年的研究表明，LL-37/CRAMP還作為重要的免疫調(diào)節(jié)分子發(fā)揮功能，在炎癥、自身免疫病以及腫瘤

2、等疾病中參與調(diào)控免疫病理過(guò)程。然而，LL-37/CRAMP的作用具有多重性，例如，可通過(guò)促進(jìn)炎性細(xì)胞激活與浸潤(rùn)表現(xiàn)促炎癥作用，也可阻斷TLR激活而發(fā)揮炎癥抑制作用;此外，在不同的疾病中表現(xiàn)出疾病惡化或保護(hù)作用。因此，在不同疾病的特異病理微環(huán)境下研究LL-37/CRAMP的免疫調(diào)控作用，對(duì)于深入了解其病理生理功能、探討新的疾病干預(yù)手段具有重要意義。
　　本課題旨在利用小鼠模型，研究CRAMP在哮喘和炎性腸病中的可能作用，揭示其在不同

3、病理微環(huán)境下的功能調(diào)控機(jī)制，并探討以其為靶點(diǎn)的治療干預(yù)策略在炎癥疾病中的應(yīng)用潛能。研究主要包括:1.通過(guò)基于巨噬細(xì)胞RAW264.7的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)以及經(jīng)鼻腔給予小鼠外源性CRAMP的動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，顯示合成的CRAMP可抑制LPS刺激RAW264.7產(chǎn)生TNF，在體內(nèi)可誘導(dǎo)氣道炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及炎性細(xì)胞因子表達(dá);2.以卵清蛋白(OVA)成功誘導(dǎo)了小鼠急性哮喘模型，外源性給予CRAMP影響了氣道炎性細(xì)胞因子水平、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、過(guò)敏原特異抗體應(yīng)答

4、類型與水平、以及肺組織病理變化，顯示CRAMP能夠加重過(guò)敏性氣道炎癥;3.分別以TNBS及Oxazolone誘導(dǎo)了克隆氏病與結(jié)腸炎兩種小鼠炎性腸病模型，顯示CRAMP在兩種不同T細(xì)胞應(yīng)答病理機(jī)制主導(dǎo)的腸炎模型中具有顯著不同的表達(dá)水平，提示可能存在不同的病理角色;4.外源性CRAMP經(jīng)直腸給藥對(duì)Oxazolone誘導(dǎo)的小鼠腸炎進(jìn)行干預(yù)，能夠通過(guò)下調(diào)炎性細(xì)胞及炎性細(xì)胞因子水平、上調(diào)組織損傷修復(fù)相關(guān)基因表達(dá)水平等，起到治療性效果，但未影響T細(xì)

5、胞亞型應(yīng)答;5.以CRAMP經(jīng)腹腔給藥，下調(diào)了炎性細(xì)胞因子水平及炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)，但顯著增加Oxazolone誘導(dǎo)的小鼠體重?fù)p失與死亡;6.成功構(gòu)建了基于HBcAg病毒樣顆粒的抗CRAMP疫苗，通過(guò)免疫小鼠獲得抗血清并經(jīng)尾靜脈注射對(duì)Oxazolone誘導(dǎo)的小鼠腸炎進(jìn)行被動(dòng)免疫干預(yù)以拮抗異常增高的內(nèi)源性CRAMP，未發(fā)現(xiàn)顯著影響小鼠腸炎，提示CRAMP主要是通過(guò)影響腸上皮修復(fù)而非影響適應(yīng)性T細(xì)胞炎癥免疫反應(yīng)發(fā)揮作用。
　　本研究結(jié)果顯