IL-20相關(guān)因子在小鼠免疫性心肌炎中的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:免疫相關(guān)因素與心肌炎引起的心肌纖維化密切相關(guān)。前期研究表明，IL-10家族成員在心肌炎慢性期心肌纖維化的形成過程中發(fā)揮重要作用。IL-20是最新發(fā)現(xiàn)的IL-10家族成員之一，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和分化的作用。但I(xiàn)L-20是否參與心肌炎心肌纖維化過程尚不清楚。本課題通過實(shí)驗(yàn)探討IL-20及其相關(guān)因子對小鼠自身免疫性心肌炎(EAM)心肌纖維化的影響及可能的分子調(diào)節(jié)機(jī)制。
　　方法:利用小鼠心肌肌球蛋白多肽MyHC614-629和完全

2、弗氏佐劑充分混合后，于第0天和第7天皮下注射建立小鼠EAM模型;組織切片H&E染色及Masson染色評估心肌組織炎癥及纖維化程度;Realtime PCR及Western blot檢測IL-20家族因子及其受體在心肌組織中EAM不同時(shí)程的表達(dá)變化;免疫熒光確定IL-20受體在心肌組織中的分布狀態(tài);在體外實(shí)驗(yàn)，利用CCK-8法檢測IL-20家族因子對心肌成纖維細(xì)胞增殖活性的影響，并初步探討其調(diào)節(jié)心肌纖維化的可能分子機(jī)制。
　　結(jié)果:

3、在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，EAM小鼠2周時(shí)心肌組織可見少量炎性細(xì)胞浸潤;3周時(shí)心肌組織炎性細(xì)胞浸潤及組織損傷明顯加重;4周時(shí)心肌組織炎癥反應(yīng)明顯減輕，少量膠原纖維形成;2月時(shí)心肌間質(zhì)膠原纖維大量沉積，形成以心肌纖維化為主的病理過程。IL-20相關(guān)因子及其受體的表達(dá)與心肌纖維化程度呈正相關(guān)，其受體之一主要分布于心肌間質(zhì)的成纖維細(xì)胞。在體外實(shí)驗(yàn)中，IL-20促進(jìn)了小鼠原代心肌成纖維細(xì)胞(PCF)和心肌成纖維細(xì)胞系(L-929)的增殖活性增加，并引起其受