生長(zhǎng)抑素在小鼠高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎時(shí)對(duì)PI3K-PKB細(xì)胞信號(hào)通路的影響.pdf

1、目的:1.了解PI3K/PKB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎中的變化，進(jìn)一步探討高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎的發(fā)病機(jī)制。2.研究生長(zhǎng)抑素與PI3K/PKB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào)節(jié)關(guān)系，了解生長(zhǎng)抑素對(duì)PI3K/PKB細(xì)胞信號(hào)通路的影響，進(jìn)一步闡明生長(zhǎng)抑素治療高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎的機(jī)制。
　　方法:1.將健康清潔級(jí)雄性昆明小鼠30只，體重20-24g。隨機(jī)分為3組，即正常組（A組，n=10），高脂血癥相關(guān)性胰腺炎組（B組，n=10），

2、高脂血癥相關(guān)性胰腺炎+生長(zhǎng)抑素組（C組，n=10）。2.A組:采用普通食料喂養(yǎng)。B組及C組:采用高脂食料（主要成份87.8％基礎(chǔ)飼料+10％豬油+2％膽固醇+0.2％膽酸鈉）喂養(yǎng)。A組腹腔注射生理鹽水用于對(duì)照。B組:腹腔注射雨蛙素聯(lián)合脂多糖構(gòu)建急性胰腺炎模型。C組:建立動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃?，皮下注射生長(zhǎng)抑素進(jìn)行干預(yù)。3.三組造模后每只小鼠在12小時(shí)分別經(jīng)摘除眼球取血約2ml，利用全自動(dòng)生化分析儀器對(duì)血清標(biāo)本中的血脂、血淀粉酶等進(jìn)行測(cè)定。采用E

3、LISA法檢測(cè)血清細(xì)胞因子（TNF-α、IL-1等）的變化情況。4.取胰腺組織行HE染色，觀察胰腺病理學(xué)變化，并采用Grewal評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)行病理評(píng)分分級(jí)。利用免疫組化檢測(cè)PI3K/PKB（磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B）表達(dá)活性和NF-κB（核因子）表達(dá)情況。以上收集的數(shù)據(jù)用mean±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）來(lái)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)描述，分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件，單因素方差分析(one-way anova)來(lái)比較兩組樣本的均數(shù)，P＜0.05，認(rèn)

4、為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:1.A、B、C組三組小鼠經(jīng)普通食料及高脂食料喂養(yǎng)后，B組及C組小鼠毛發(fā)比A組密集光亮，三組小鼠初始體重相比，P＜0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， B組與A組、C組與A組最終體重和體重增量相比，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.B組及C組血清TG（甘油三酯）、Tc（總膽固醇）和Amy（淀粉酶）較A組升高，使用生長(zhǎng)抑素進(jìn)行干預(yù)后， C組上述指標(biāo)較未干預(yù)的B組淀粉酶降低，P＜0.05，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

5、。3.采用ELISA法檢測(cè)血清細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1)結(jié)果顯示:B組及C組水平明顯高于A組，經(jīng)生長(zhǎng)抑素抑素干預(yù)后，C組水平低于B組，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.胰腺HE染色及評(píng)分顯示:B組及C組胰腺組織的病理評(píng)分高于A組，P＜0.05，表明AP模型建模成功。同時(shí)使用生長(zhǎng)抑素進(jìn)行干預(yù)實(shí)驗(yàn)后，C組病理評(píng)分高于A組，而低于B組，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5.胰腺免疫組化檢測(cè)PKB及NF-κB表達(dá)情況顯示:B組及C組與

6、A組小鼠比較兩種蛋白表達(dá)升高，B組及C組胰腺組織兩種蛋白免疫組化染色I(xiàn)HS評(píng)分均高于A組，P＜0.05，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C組胰腺組織兩蛋白免疫組化染色I(xiàn)HS評(píng)分低于B組，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示生長(zhǎng)抑素能夠下調(diào)高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎小鼠胰腺組織PKB及NF-κB蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)論:1.高脂血癥相關(guān)性急性胰腺炎時(shí)炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展，可能與PI3K/PKB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路通過(guò)上調(diào)核因子NF-KB，促進(jìn)炎性介質(zhì)TNF-